ارزیابی نورونزایی سلولهای بنیادی عصبی با استفاده از فلوسیتومتری و مقایسهی آن با روش شمارش دستی
نویسندگان
1
2
3
4
5
doi
چکیده
مقدمه: شناخت عوامل مؤثر در افزایش نورونزایی سلولهای بنیادی عصبی برای جایگزینی نورونهای از دست رفته در بیماریهای عصبی از اهمیت زیادی برخوردار است. کشت سلولهای بنیادی عصبی روشی مطلوب در شناخت این عوامل به نظر میرسد ولی در آنالیز سلولی باید از روشی سریعتر و کارآمدتر از روش شمارش دستی بهره جست تا از طریق آن بتوان تعداد زیادی از عوامل را در کمترین زمان و هزینه مورد بررسی قرار داد. هدف این مطالعه، استفاده از فلوسیتومتری به عنوان روشی جایگزین برای ارزیابی میزان نورونزایی سلولهای بنیادی عصبی بود. روش ها: سلولهای بنیادی عصبی جدا شده از مغز جنینهای 14 روزه موش، طی روشهای یک مرحلهای و دو مرحلهای تمایز داده شدند. پس از انجام هیستوشیمی برای مارکرهای نورونی و آستروسیتی، ابتدا روش شمارش دستی با روش فلوسیتومتری در تعیین درصد نورونها و آستروسیتها مقایسه شد و سپس دو روش مختلف تمایز سلولهای بنیادی عصبی از نظر درصد نورونها و آستروسیتهای ایجاد شده، با استفاده از فلوسیتومتری با یکدیگر مقایسه گردیدند. یافته ها: در ارزیابی میانگین درصد نورونها و آستروسیتها بین روشهای شمارش دستی و فلوسیتومتری تفاوتی مشاهده نشد. بررسی فلوسیتومتری، تفاوت معنیداری را بین میانگین درصد نورونها و آستروسیتهای روشهای یک مرحلهای و دو مرحلهای تمایز سلولهای بنیادی عصبی نشان داد (001/0>p). نتیجه گیری: نتایج نشان داد که فلوسیتومتری روش ساده و قابل اعتمادی است که میتوان از آن به جای شمارشهای دستی در ارزیابی میزان نورونزایی سلولهای بنیادی عصبی استفاده کرد. این مسأله به ویژه در غربالگری تأثیر مواد و عوامل مختلف بر میزان نورونزایی از اهمیت به سزایی برخوردار است. واژگان کلیدی: سلولهای بنیادی عصبی، تمایز، فلوسیتومتری، نورونزایی