جداسازی و خالص‌ کردن سلول‏های بنیادی پرتوان تولیدکننده اسپرماتوگونی از بافت بیضه بز بالغ

نویسندگان

1 دانشجوی دکتری گروه علوم دامی، دانشکدۀ علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران

2 استاد گروه علوم دامی، دانشکدۀ علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران

3 استادیار گروه زیست‌فناوری دامی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست‌فناوری، تهران، ایران

doi
10.22059/jap.2014.52229
چکیده

سلول‏های بینادی اسپرماتوگونی بنیان‌گذار و نقطۀ شروع اسپرماتوژنز هستند و تنها سلول‏های بنیادی در بدن به‌شمار می‌آیند که می‏توانند اطلاعات ژنتیکی را از والدین به نتاج منتقل کنند. این تحقیق به‌منظور بررسی روش دسترسی به منبع قابل اطمینانی از این نوع سلول‏ها از بافت بیضۀ بز، در طی چهار مرحلۀ جمع‏آوری و آماده‏سازی بافت بیضه، هضم آنزیمی بافت، عبور سلول‏ها از صافی سلولی، و کاشت سلول‏های بینادی اسپرماتوگونی روی فیبروبلاست انجام شد. نشانگرهای ژنی خاص پرتوانی چون (NANOG)Homeobox transcription factor، (SOX2) Sex determining region Y-box 2، و (OCT4)Octamer-binding transcription factor 4 در سلول‏های پرتوان جداشده از بیضۀ بز بیان شدند. تست نشانگرهای پروتئینی مانند واکنش آلکالین فسفاتاز در این سلول‏ها مثبت بود. این سلول‏ها در شرایط کشت هم‌زمان با سلول‏های فیبروبلاستی جنینی بز، برای چندین پاساژ بدون وقوع تمایز یا تغییر شکل، تکثیر شدند. افزون بر آن این سلول‏ها قابلیت نگهداری در دمای 70- سانتی‏گراد را به‌مدت یک ماه با استفاده از دی‌متیل‌سولفواکساید (DMSO) داشتند. نتایج نشان داد که روش به‏کار‌گرفته‌شده برای جداسازی و تکثیر این سلول‏ها از بافت بیضۀ بز مناسب است و سلول‏های حاصل افزون بر توانایی بیان ژن‏های پرتوان می‏توانند برای مدتی طولانی و در مقادیر قابل قبول و بدون تمایز در محیط کشت تکثیر شوند.