بررسی و بهینه¬سازی برخی عوامل موثر بر انتقال ژن بتا-گلوکورونیداز (gusA) با واسطه آگروباکتریوم در سیب پاکوتاه (Malus domestica.Borkh var.Gami Almasi)
نویسندگان
1 کارشناس ارشد بیوتکنولوژی، گروه باغبانی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه ارومیه، ارومیه
2 دانشیار، گروه زراعت و اصلاح نباتات، دانشکده کشاورزی، دانشگاه ارومیه، ارومیه
3 استادیار، گروه باغبانی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه ارومیه، ارومیه
4 استادیار گروه بیوتکنولوژی دانشگاه بوعلیسینا همدان، همدان
5 دانشیار پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و فناوری زیستی تهران
6 دانشجوی دکتری بیوتکنولوژی پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تبریز
doi
چکیده
سیب گمیالماسی یکی از ارقام پاکوتاه سیب است که منشاء آن شمالغرب ایران بوده و به لحاظ ویژگیهای مناسب از نظر باغبانی حائز اهمیت میباشد. انتقال ژن با استفاده از آگروباکتریوم یکی از روشهای تراریختی است که تاکنون در مورد بسیاری از گونهها و ارقام انجام گرفته است. بهینهسازی عوامل مختلف تاثیر گذار در تراریختی و باززایی گیاهان تراریخت لازمه برنامههای انتقال ژن محسوب میشود. در این پژوهش با استفاده از انتقال ژن بتا گلوکورونیداز برخی از عوامل موثر در تراریختی سیب گمی برای اولین بار در ایران مورد بررسی قرار گرفت. سویه آگروباکتریوم، غلظت باکتری، مدت زمان تلقیح، طول مدت کشت همزمان و نوع محیط القای بیماریزایی باکتری و تاثیر آنها در میزان تراریختی، از عوامل مورد بررسی بودند. در آزمایشهای تراریختی غلظت موثر کانامایسین برای انتخاب تراریختها 50 میلیگرم در لیتر بهدست آمد و از بین تیمارهای مختلف سویه GV3850 نسبت به GV3101 موثرتر بود. بر اساس نتایج دو روز کشت همزمان و استفاده از محیط LB بهعنوان محیط آلودگی آگروباکتریومی نسبت به AB مناسبتر تشخیص داده شد. درصد تراریختی در بهترین تیمار 2 درصد بود.
