جداسازی و شناسایی قارچهای حلکننده فسفات از خاکهای شور- سدیمی (مطالعه موردی: منطقه کرفون استان مازندران)
نویسندگان
1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه علوم خاک، دانشکده علوم زراعی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری
2 استادیار، گروه علوم خاک، دانشکده علوم زراعی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری
3 مربی، گروه علوم خاک، دانشکده علوم زراعی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری
4 استادیار، گروه علوم خاک، دانشکده علوم زراعی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری
doi
10.22092/sbj.2020.122745چکیده
شوری خاک فاکتور اصلی در کاهش تولید محصول مخصوصاً در نواحی خشک است. دسترسی به فسفر که یکی از عناصر پرمصرف مورد نیاز برای رشد و نمو گیاهان است در خاکهای تحت تأثیر نمک کم میباشد. هدف از این مطالعه جداسازی و شناسایی قارچهای حلکننده فسفات از خاکهای شور- سدیمی و بررسی انحلال فسفات در حضور غلظتهای مختلف نمک بود. به این منظور تعداد 20 نمونه خاک ریزوسفری گیاه سالیکورنیا(Salicornia persica) از اراضی منطقه کرفون استان مازندران برداشت شد. تعداد پنج جدایه قارچ حلکننده فسفات با تکینک کشت بر روی پلیتNBRIP-BPB[1] جداسازی شدند. برای بررسی تحمل جدایهها به شوری، تمامی جدایهها در محیطکشت جامد NBRIP-BPB حاوی غلظتهای 0، 0،50، 100، 200، 400،600، 800 و 1000 میلی مولار NaCl کشت شدند. به منظور حصول اطمینان از توانایی انحلال فسفات جدایهها، کشت شش روزه جدایهها در محیط کشت مایع NBRIP فاقد NaCl صورت گرفت. جدایهای که بیشترین میزان فسفر را آزاد نمود برای مطالعات بیشتر در محیطکشت مایع در حضور غلظتهای مختلف NaCl انتخاب شد. اثر شوری بر انحلال فسفر با اعمال غلظتهای 0، 50، 100، 200، 400، 600، 800 و 1000 میلی مولار NaCl در محیط کشت مایع NBRIP در طول 15 روز انجام شد. آزمون توانایی انحلال فسفات جدایهها در محیط کشت جامد در حضور غلظتهای مختلف NaCl نشان داد تمامی جدایهها قادر به تشکیل هاله تا شوری 200 میلیمولار NaClبودند ولی در ادامه با افزایش شوری تا 1000 میلی مولار تنها جدایههای KARFUN1 و KARFUN 2توانایی انحلال فسفات را نشان دادند. در آزمون شش روزه توانایی انحلال فسفات جدایهها در محیط کشت مایع، جدایهKARFUN 1 بیشترینقابلیت انحلال فسفات را نسبت به سایر جدایهها داشت. انجام شناسایی مولکولی مشابهت 100 درصدی جدایه KARFUN 1را با گونههای Aspergillus niger و Aspergillus tubingensis نشان داد. نتایج انحلال فسفات در محیط کشت مایع در حضور غلظتهای مختلف NaCl نشان داد صرف نظر از غلظت NaCl، سویه KARFUN 1غلظت قادر به انحلال فسفات از تری کلسیم فسفات و کاهش pH محیط کشت بود. بهرحال، کمترین میزان فسفر در غلظت 1000 میلیمولار NaCl و بیشترین آن در تیمار شاهد حاصل شد. ماکزیمم انحلال فسفات به میزان 549 میلیگرم در لیتر در شوری صفر و 12 روز پس از آغاز انکوباسیون بهدست آمد. در این زمان pH از 6 به 19/1 کاهش یافت. بهر حال، سویه KARFUN 1 توانایی انحلال فسفات را در غلظتهای مختلف NaCl حفظ نمود به طوریکه سویه مذکور توانست میزان 224 میلی گرم در لیتر فسفر را در غلظت 1000 میلیمولار NaCl آزاد نماید. [1]. National Botanical Research Institute’s phosphate growth medium- Bromo Phenol Blue