شناسایی Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map) با استفاده از مارکرهای ژنتیکیF57, IS1311, HspX, Map02, ISMav2, Locus 255 ،مکملی بر مارکر شناخته شده IS900.
نویسندگان
1 دپارتمان میکروب شناسی، دانشکده علوم پایه، شعبه قم، قم، ایران کدپستی: 3749113191
2 دپارتمان میکروب شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد قم، دانشگاه آزاد اسلامی، قم، ایران.
3 دپارتمان میکروب شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد قم، دانشگاه آزاد اسلامی، قم، ایران.
4 موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی بخش میکروب شناسی
5 موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی بخش واکسن های دامپزشکی باکتریایی هوازی
doi
10.22092/vj.2024.367048.2178چکیده
مقدمه مایکوباکتریوم ایویوم زیرگونه پاراتوبرکولوزیس Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map)عامل ایجاد بیماری یون (پارتوبرکولوزیس) در نشخوارکنندگان می باشد. این باکتری دارای کند ترین سرعت رشد در میان مایکوباکتریوم های قابل رشد و کشت نمونه های مشکوک به آن 12 هفته و یا حتی بیشتر پیش از آنکه پرگنه مشهودی ایجاد نماید، بطول می انجامد. در حال حاضر IS900 شناخته شده ترین مارکر ژنتیکی در پروتکل های تشخیصی Map با پایه PCR می باشد. بواسطه شناسایی عناصر ژنتیکی شبیه IS900 در ژنوم مایکوباکتریوم های دیگر، اختصاصیت این مارکر زیر سوال قرار گرفته استهدف در مطالعه حاضر کاربرد این مارکر همراه با شش مارکر دیگر اختصاصی شامل F57, IS1311, HspX, Map02, ISMav2 and Locus 255 شرح داده شده است.روش کار واکنش های PCR بصورت انفرادی و به روش متعارف اجرا گردیدند. تمهیدات لازم برای بهینه سازی شرایط دما و اجزاء واکنش به نحوی انجام پذیرفت که واکنش های همه مارکرها توسط یک پروتکل قابل اجرا باشند. این رویه بر روی 30 جدایه بومی Map جمع آوری شده از گاو (24 مورد)، بز (2 مورد) و گوسفند ( 4 مورد) در استان های اصفهان، البرز، تهران، زنجان، فارس و قزوین اجرا گردید.یافته ها اجرای این روش در تمام واکنش های PCR بر روی همه جدایه ها و همچنین سویه آزمایشگاهی Map 316f با موفقیت همراه بود و محصولات مورد انتظار در تکثیر بطول 560 ، 704، 608، 211، 278 ، 507 و 404 زوج باز بترتیب در مورد مارکرهای IS900، F57، IS1311، HspX، Map02، ISMav2 و Locus 255 تولید شدند.نتیجه گیری در شرایط ایران که مارکر ژنتیکی IS900 همچنان به عنوان ستون فقرات در روش های مولکولی تشخیص Map بکار گرفته می شود، استفاده همزمان آن با هر یک از شش مارکر ژنتیکی شرح داده شده در این مطالعه به توانایی آزمایشگاه در تشخیص صحیح Map خواهد افزود.