فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

ویروس موزائیک گل‌کلم  (Cauliflower Mosaic Virus= CaMV)نخستین ویروس گیاهی شناسایی شده دارای ژنوم DNA است که خسارت اقتصادی زیادی به گیاهان خانواده Brassicaceae وارد می­کند. تولید موفق کپسید­های این ویروس هم در تشخیص سرولوژیکی آن و هم در تشکیل ذرات شبه ویروسی Virus-Like Particles = VLPs مفید است. در این تحقیق، DNA نمونه­های گل کلم دارای علایم مشکوک به ویروس، استخراج و ژن پروتئین پوششی (Coat protein= CP) ویروس توسط آغازگرهای اختصاصی در PCR تکثیر شد. سپس توسط آنزیم­های برشی BamHI و SmaI در وکتور بیانی  pGEX2TKدر پایین دست GST وارد و بعد از تایید وکتور نوترکیب، توالی­یابی انجام شد و توالی بدست آمده در پایگاه داده NCBI با برنامه BLASTn با توالی­های موجود در بانک ژن مقایسه شد و مشخص گردید که این توالی مربوط به ویروس CaMV با شماره دسترسی KF357590.1 در پایگاه NCBI است. بیان پروتئین CP در باکتری E. coli سویه Rosetta القاء و بهینه­سازی شد. بیان بسیار بالای این پروتئین در دمای 37 درجه سانتی­گراد و شش ساعت پس از القا به کمک IPTG با غلظت نهایی 1mM بدست آمد. سپس این پروتئین با نانوذرات سفاروز که توانایی اتصال به GST را دارند خالص­سازی و در SDS-PAGE مشاهده شد. پروتئین­های خالص شده CP با میکروسکوپ الکترونی بررسی شد و ذرات شبه ویروسی (VLPs) مشاهده گردید. تصاویر مربوط به میکروسکوپ الکترونی تولید VLPs این ویروس را بدون ایجاد اینکلوژن بادی و با مونتاژ صحیح تائید می­کند که می­تواند در حمل دارو در پزشکی مورد آزمایش قرار گیرد.