بررسی تأثیر عاملهای مؤثر در میزان تشکیل پروتوپلاست در قارچ Fusarium oxysporum با هدف استفاده در امتزاج پروتوپلاست
نویسندگان
1 دانشجوی دکتری، گروه گیاهپزشکی، دانشکدۀ کشاورزی دانشگاه زنجان
2 استاد گروه گیاهپزشکی پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج
doi
10.22059/ijpps.2018.240366.1006798چکیده
امتزاج پروتوپلاست یکی از سیستمهای تراریختی مؤثر در ایجاد تغییرهای ژنتیکی به منظور بهبود عملکرد میکروارگانیسم (ریزجانداران) است که امروزه در جهت رسیدن به یک عامل بیوکنترل (مهار زیستی) موفق در کنترل علف هرزهای مختلف استفاده میشود. در روشهای معمول تراریختی قارچهای رشتهای مانند گونههای فوزاریوم، تهیۀ پروتوپلاست نخستین گام است. در این پژوهش، پس از جداسازی قارچ Fusarium oxysporum (عامل پژمردگی آوندی) از گیاه گل جالیز Orobanche sp.، بررسیهای لازم برای شناسایی ریختشناسی و مولکولی آن انجام شد. سپس تأثیر عاملهای مختلف مانند تأثیر نوع محیط کشت در مقدار اسپور تولید شده، بهترین زمان برای جوانهزنی بیشینهای اسپورها، غلظتهای مختلف آنزیمهای تجزیهکنندۀ دیوارۀ سلولی، زمان در معرض قرارگیری با آنزیم در تعداد پروتوپلاستهای تولیدشده و نیز نوع و غلظت تثبیتکنندۀ اسمزی در ایجاد و میزان زندهمانی پروتوپلاستها ارزیابی شد. نتایج بهدستآمده از تجزیۀ آماری دادهها، محیط Spezieller Nährstoffarmer Agar بهترین محیط کشت و زمان 16 ساعت را بهترین زمان برای ایجاد و جوانهزنی اسپورها معرفی کرد. همچنین ترکیب آنزیمی Glucanex (15 Mm) و Driselase (20 Mm) در زمان پنج ساعت با فاصلۀ معنیداری از دیگر تیمارها بیشترین پروتوپلاست را تولید کرده و تثبیتکنندۀ KCl (6/0 مولار) نیز به عنوان بهترین تثبیتکننده معرفی شد.