بررسی اثر ضدسرطانی لانتیبیوتیک Lacticin 3147
نویسندگان
1 دانشجوی دکتری میکروبیولوژی ، گروه زیست شناسی ، واحددامغان ، دانشگاه آزاد اسلامی، دامغان، ایران
2 دانشیار بیوشیمی ، گروه پاتوبیولوژِی،دانشکده بهداشت ، دانشگاه علوم پزشکی تهران ، تهران ، ایران.(نویسنده مسئول)
3 استادیار قارچ شناسی ، گروه زیست شناسی ، واحددامغان ، دانشگاه آزاد اسلامی، دامغان، ایران.(نویسنده مسئول)
4 گروه زیست شناسی ، واحد پرند ، دانشگاه آزاد اسلامی،پرند، ایران
doi
10.22038/mjms.2022.22573چکیده
مقدمهبیشترین نوع سرطان مربوط به سرطان پوست بخصوص در مردان است. Lacticin 3147، باکتریوسینی از خانواده لانتیبیوتیکهاست. هرچند هنوز شواهدی برای اثرات ضدسرطانی آن گزارش نشده است، به دلیل مشابهت به نایسین برای بررسی این اثر درنظر گرفته شد. هدف بررسی اثر Lacticin 3147 بود.روش کارابتدا سلولهای A431 کشت داده شدند و سنجش بقای سلولی و میزان سمیت سلولی Lacticin 3147 بر سلولهای کارسینومای اپیدرموئید انسانی A431 پس از 24 و 48 ساعت تیمار توسط روش رنگ سنجی MTT Assay بررسی شد. آپوپتوز سلولی با سنجش فعالیت کاسپازهای 8 و 9 در سلولهای سرطانی A431 تیمار شده با غلظت IC50 Lacticin 3147 پس از 24، 48 و 72 ساعت بررسی شد. از روش Boyden Chamber جهت ارزیابی توانایی تهاجم سلولهای سرطانی A431 تیمار شده با دوز زیرکشنده Lacticin 3147 استفاده شد. آغازگرهای اختصاصی برای ژنهای پروآپوپتوتیک Bax، آنتیآپوپتوتیک Bcl-2 و ژن مرجع ꞵ-actin طراحی و میزان بیان آنها درسلولهای A431 تیمار شده با غلظت IC50 Lacticin 3147 با استفاده از روش Real Time PCR کمی، مورد بررسی قرار گرفت. تجزیه و تحلیل دادهها توسط نرمافزار SPSS 16 و آزمون آماری ANOVA انجام گردید ( 05/0(P<.نتایجبررسی آماری دادههای بهدست آمده از آزمون MTTنشان داد که رشد سلولهای تیمار شده با غلظتهای مختلف Lacticin 3147 بهطور معنیداری کاهش پیدا کرده است (001/ 0p<). تأثیر مهاری Lacticin 3147 بر زندهمانی سلولهای A431 وابسته به غلظت و زمان تیمار است. بهطوریکه بیشترین تأثیر درغلظت µM 3/0 و مدت 72 ساعت مشاهده شد. غلظت IC50 Lacticin 3147 برابر باµM 8/0 بهدست آمد. فعالیت کاسپازهای 8 و 9 در سلولهای سرطانی A431 تیمار شده به صورت وابسته به زمان افزایش یافت و پس از 72 ساعت نسبت به کنترل بهترتیب 36/2 و 72/2 برابر شد (001/ 0p<). توان تهاجم سلولهای سرطانی A431 تیمار شده با دوز زیرکشنده Lacticin 3147 بهطور وابسته به دوز کاهش یافت و در غلظتµM 5/0 با حداقل اثر کشندگی، کمترین توان تهاجم را نشان داد (001/0>p).نتیجه گیریبیان ژن پروآپوپتوتیک Bax در سلولهایA431 تیمار شده با غلظت IC50 Lacticin 3147 بهطور قابل ملاحظهای (001/0>p) افزایش یافت. همچنین کاهش بیان ژن آنتیآپوپتوتیک Bcl-2 در همان شرایط معنیدار بود. درنتیجه، استفاده از Lacticin 3147 در آینده ممکن است به یک استراتژی جدید برای درمان سرطان پوست منجر شود.