تغییر ترکیب محیط کشت بهعنوان یک راهکار بیوتکنولوژیکی در افزایش سنتز پودوفیلوتوکسین در کشت سلولی Linum album Ky. ex Boiss.
نویسندگان
1 دانشیار، گروه علوم گیاهی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس
2 دانشیار، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت
3 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه زیستشناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت
doi
10.22092/ijmapr.2015.12619چکیده
Linum album Ky. ex Boiss.، یکی از گونههای انحصاری در ایران است که ترکیبهای لیگنانی مهمی را ازجمله پودوفیلوتوکسین (PTOX) تولید میکند. این ترکیب پیشساز سه نوع داروی مهم ضدسرطان به نامهای تنیپوساید، اتوپوساید و اتوپوفوز میباشد. سنتز شیمیایی این ترکیبها بسیار پیچیده است و از نظر تجاری تولید آن مقرون بهصرفه نیست. در افزایش سنتز پودوفیلوتوکسین از راهبردهای گوناگونی مانند تغییر رژیم غذایی، بکار بردن الیسیتور، مهندسی ژنتیک و غیره استفاده میشود. بهینهسازی محیط کشت یکی از راهبردهای مهم در افزایش متابولیتهای ثانویه در کشت سلولی است. با توجه به اهمیت زیاد پودوفیلوتوکسین بهعنوان ترکیب پیشساز سه نوع داروی مهم ضدسرطان، در این تحقیق تأثیر نسبتهای مختلف آمونیوم و نیترات در محیط کشت بر رشد سلولها و برخی متابولیتهای ثانویه ازجمله تولید پودوفیلوتوکسین و فعالیت آنزیم کلیدی فنیلآلانین آمونیالیاز (PAL) بررسی شد. میزان رشد سلولها در نسبت 2:1 نیترات به آمونیوم نسبت به تیمارهای دیگر افزایش معنیداری داشت. بیشترین میزان ترکیبهای فنلی و فلاونوییدی در نمونه کنترل بدست آمد که کمترین میزان وزن تر را داشت و بیشترین مقدار فلاونول در نسبت 2:1 آمونیوم به نیترات مشاهده شد. بیشترین میزان سنتز پودوفیلوتوکسین در نسبت 3:1 آمونیوم به نیترات ایجاد شد. همچنین بیشترین میزان فعالیت آنزیم PAL بهترتیب در سه نمونه 2:1 و 3:1 نیترات به آمونیوم و 3:1 آمونیوم به نیترات ایجاد شد. بنابراین میتوان نتیجه گرفت که تغییر ترکیب محیط کشت یک فاکتور مؤثر در افزایش سنتز متابولیتهای ثانویه در سلولهای L. album بود.