جداسازی سلولهای B با استفاده از نانوذرات مغناطیسی و بررسی اثر رنگآمیزی سلولها و مقدار نانوذرات بر جداسازی آنها
نویسندگان
1 دانشگاه بین المللی امام خمینی
doi
10.22034/ijche.2024.423328.1364چکیده
امروزه از نانوذرات و میکروذرات مغناطیسی در کاربردهای مختلف پزشکی و درمان مانند MRI ، ترمیم بافت، رهایش دارو، هایپرترمی و جداسازی سلولها استفاده می شود. یکی از مهمترین سلولهایی که باید جداسازی شود، سلولهای لنفاوی است؛ زیرا نقش بسیار مهمی در درمان سرطانهای لنفوم و ایمونوتراپی دارد. لذا، در این مطالعه سلولهای B از PBMCs بااستفاده از نانوذرت مغناطیسی اکسید آهن پوشش داده شده با پکتین جدا شده است. به منظور جداسازی هدفمند سلول های B ، آنتی بادی FITC anti-human CD20 بااستفاده از EDC/NHS به نانوذرات، متصل و با فلوسایتومتری آنالیز شده است. در مرحلۀ بعد، سلولهای B با نانوذرات حاوی آنتی بادی از بقیۀ سلولها جدا و با فلوسایتومتری بازده جداسازی بررسی شده است. نتایج فلوسایتومتری نشان میدهد که آنتیبادی به نانوذرات متصل شده و میزان MFI آن برابر با 55 است. بازده جداسازی سلولها 75 تا 82 درصد است. همچنین، مشخص شد که با رنگآمیزی سلولها بعد از جداسازی، میزان بازده واکنش تا حدودی نسبت به حالت بدون رنگآمیزی و آنالیز مستقیم سلولها بعد از شستوشو با فلوسایتومتری از 81 درصد به 76 درصد کاهش می یابد. علاوه بر این، نتایج نشان داد که مقدار مناسب نانوذرات در واکنش با سلولها 50 میکرولیتر است و کاهش آن موجب کاهش 30 درصدی در بازده جداسازی میشود.