جداسازی و شناسایی باکتری کریزئوباکتریوم ایندولوجنس سویه BYK27 مولد پروتئاز از پساب کارخانه شیر پگاه کرمان
نویسندگان
1 دانشیار گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران
2 دانشگاه شهید باهنر کرمان
3 دانشجوی کارشناسی ارشد میکروبیولوژی
doi
چکیده
پروتئازها از جمله مهمترین آنزیمهای صنعتی هستند که حدود 65 درصد از بازار جهانی آنزیم های صنعتی و حدود 25 درصد از تولید کل آنزیم ها را به خود اختصاص دادهاند. پروتئازها در صنایع مختلف از جمله افزودنیهای شویندهها، تیمار فاضلاب، بازیافت نقره و در صنایع غذایی، چرمسازی، بازیافت نقره از فیلمهای عکس برداری با اشعه ایکس و داروسازی کاربرد دارند. در این تحقیق باکتری مولد آنزیم پروتئاز از پساب کارخانه شیر پگاه کرمان جداسازی شد. ایجاد هاله در اطراف کلنیهای رشد کرده در محیط حاوی اسکیم میلک آگار) 5 درصد( نشانگر فعالیت پروتئولیتیک میباشد. سویه دارای بالاترین فعالیت پروتئازی از لحاظ بیوشیمیایی و مولکولی (توالییابی ژن 16S rRNA) شناسایی شد کهChryseobacterium indologenes میباشد. پروتئاز تولیدی توسط این سویه در سه مرحله رسوبگذاری با آمونیوم سولفات، دیالیز در بافر تریس 35 میلی مولار و کروماتوگرافی تعویض یونی Q-سفاروز به طور نسبی خالص شد. میزان فعالیت پروتئازی با استفاده از روش زایموگرافی مورد تایید قرار گرفت. این آنزیم دارای بیشترین فعالیت در دمای °C 40، 8 pH و بیشترین پایداری در دمای °C 40، 9-8 pH میباشد. تریتون X-100 و شوینده تجاری تاژ باعث افزایش فعالیت و پایداری فعالیت پروتئازی شدند. آنزیم پروتئاز تولید شده در غلظت شوری 1% بیشترین فعالیت پروتئازی را نشان میدهد. این نتایج خاطرنشان میسازد که این آنزیم قابلیت استفاده در بیوتکنولوژی از جمله در صنایع شوینده، فرآوری گوشت و سنتز ترکیبات با ارزش را دارا میباشد.