ژنوتایپینگ مجتمع عمده پذیرش بافتی طیور با روش تحلیل دقیق دمای شکافت

نویسندگان

1 دانشجوی دکترای تخصصی ایمنی‌شناسی، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

2 استادیار گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

3 استادیار گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

4 استاد گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

doi
10.22055/ivj.2026.560799.2869
چکیده

    مجتمع عمده پذیرش بافتی (MHC) در طیور با عنوان جایگاه ژنی B یا گروه خونی سرولوژیکی مسئول کنترل مقاومت به بیماری‌ها از جمله بیماری‌های خود ایمن، ویروسی، باکتریائی و انگلی است.  ریزماهواره LEI0258 به عنوان یک شاخص معتبر برای تایپینگ MHC بافتی طیور می‌تواند برای تعیین هویت جمعیت­ های مختلف و ویژگی­ های فردی یا نژادی در مطالعات آکادمیک و کاربردی استفاده شود.  در این تحقیق از روش‌ تحلیل دقیق دمای شکافت (HRM) برای تعیین ژنوتیپ‌های MHC مبتنی بر ریزماهواره LEI0258 طیورگوشتی نژاد Ross 308  استفاده شد.  بدین منظور ابتدا ژنوتیپ‌ها با روش‌های معمول PCR و الکتروفورز و همچنین تحلیل قطعه­ ای مشخص شدند و سپس نتایج روش معمول با نتایج آزمون HRM مورد مقایسه و بررسی قرار گرفتند.  از تعداد 100 نمونه 5 ژنوتیپ در آزمون‌های معمول PCR و الکتروفورز و همچنین تحلیل قطعه­ ای مشخص شدند. این ژنوتیپ‌ها شامل آلل‌های با وزن ملکولی 448، 385، 300 و 207 جفت باز بودند.  در تحلیل  HRM، تغییرات فلورسانس نرمال‌شده نسبت به دما (درجه سانتی ­گراد) برای پنج ژنوتیپ مختلف بررسی شد.  نتایج نشان داد که روش HRM قادر است ژنوتیپ‌های مختلف و موارد هوموزیگوت و هتروزیگوت را تفکیک کند.  در مجموع به نظر می‌رسد روش تحلیل دقیق دمای شکافت را بتوان برای بررسی تنوع ژن‌های MHC طیور به کار برد.  اگرچه با این روش نمی‌توان دقیقا آلل‌های هر کرومزوم را تشخیص داد ولی با توجه به ماهیت هم‌بارز ژن ­های MHC نتایج برای بررسی ترکیب ژنتیکی و تعیین ژنوتیپ‌ها قابل قبول خواهند بود.