تشخیص مولکولی انگل های خونی منتقله از کنه (تیلریا، بابزیا و آناپلاسما) در سگ‌های بی صاحب با استفاده از Nested PCR

نویسندگان

1 استاد گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران

2 دانشجوی دکترای تخصصی انگل‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران

3 استاد، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران

4 استادیار گروه تکنیک‌های آزمایشگاهی، دانشکده تکنیک‌های سلامت و پزشکی، دانشگاه کوت، وسیط 52001، عراق

doi
10.22055/ivj.2025.551126.2854
چکیده

    عفونت‌های انگلی خونی اغلب در سگ‌های مناطق گرمسیری، از جمله عراق، مشاهده می‌شوند.  سگ‌ها به چندین انگل خونی آلوده می‌شوند که منجر به بیماری‌های جدی‌ در آن­ها می‌شود.  این تحقیق به منظور تشخیص میکروسکوپی و مولکولی انگل‌های خونی سگ در استان واسط عراق انجام شده است.  این مطالعه مقطعی از ابتدای ماه مه 2024 تا پایان دسامبر 2024 انجام شد.  در مجموع  از 280  سگ بی­ صاحب در مناطق مختلف استان واسط عراق نمونه ­برداری انجام شد.  نمونه خون از ورید گردن سگ‌ها  گرفته شد و برای آنالیز میکروسکوپی و مولکولی مورد استفاده قرار گرفت.  گسترش‌های نازک خون تهیه شده و به منظور شناسایی آلودگی به  بابزیا، تیلریا و آناپلاسما با رنگ‌ گیمسا رنگ­ آمیزی شدند.  در ادامه از نمونه­ های خون استخراج DNA انجام شد و آزمایش nested PCR با استفاده از ژن 16S rRNA  برای گونه ­های آناپلاسما و ژن 18SrRNA  برای تشخیص گونه­ های تیلریا و بابزیا استفاده شد.  در نهایت محصولات PCR با الکتروفورز ژل آگارز تأیید شدند.  توالی‌یابی نوکلئوتیدی، صحت ژن‌های تکثیر شده را تأیید کرد و توالی‌های آنها با توالی‌های مرجع ژن‌های 16S rRNA و 18S rRNA مقایسه شد و توالی‌های جدا شده در GenBank قرار گرفتند.  در گسترش‌های خونی رنگ‌آمیزی شده گونه‌های بابزیا، تیلریا و آناپلاسما در سی و چهار سگ شناسایی شد.  بررسی PCR گونه‌های آناپلاسما را در 77 سگ (5/27٪)، گونه‌های بابزیا را در 55 سگ (6/19٪) و گونه‌های تیلریا را در 63 سگ (5/22٪) نشان داد.  شباهت بین جدایه‌های این تحقیق و سویه‌های مرجع 100 درصد یکسان بود.  یافته‌های این مطالعه نشان می‌دهد که سگ‌های ولگرد مخازن گونه‌های آناپلاسما، بابزیا و تیلریا هستند که به طور بالقوه نقش مهمی در اپیدمیولوژی و انتشار انگل‌های خونی دارند و از این رو تهدیدی اساسی برای صنعت گاوداری محسوب می‌شوند.