شناسایی ساختار ژنی سویه‌های بومی باکتری thuringiensis Bacillus جداسازی شده از خاک‌های مناطق جنگلی استان مازندران

نویسندگان

1 دانشگاه آزاد اسلامی

2

3 دانشگاه شهید بهشتی

4 دانشگاه آزاد اسلامی

doi
چکیده

سویه­های بومی (Bt) Bacillus thuringiensis از خاک­های جنگلی مناطق مختلف استان مازندران جداسازی و ژن Cry1 عامل تولید پروتئین موثر روی حشرات،در آنها ردیابی شد. از 32 نمونه خاک مورد بررسی از طریق بازدارندگی انتخابی استات­سدیم، 144 سویه­ی باسیلوس جداسازی گردید. پس از کشت کلنی­ها، رنگ­آمیزی اختصاصی و شناسایی میکروسکوپی در 63/32% از سویه­ها پروتئین­های کریستالی مشاهده شد که برای بسیاری از حشرات سمی هستند. بررسی جدایه­های Bt نشان داد که در هفت جدایه، ژن Cry1 وجود دارد. آزمایش‌های تعیین ساختار ژنی برای وجود چهار ژن Cry1A (شامل Aa ، Ab ، Ac و Ad ) و ژن‌های Cry1B ، Cry1C ، Cry1D ، Cry1E ، Cry1F ، Cry1G ، Cry1H ، Cry1I ، Cry1J و Cry1K با استفاده از 14 جفت آغازگر اختصاصی انجام شد. ژن­های Cry1Ac و Cry1I در تمامی سویه­ها مشاهده شد، ولی ژن­های Cry1Aa ، Cry1E و Cry1G در هیچ یک از سویه­ها یافت نشدند. نتایج این پژوهش نشان داد که از این شیوه‌های مولکولی می­توان برای ردیابی سویه­های بومی باکتری Bt که دارای پروتئین­های موثر روی حشرات هستند، استفاده کرد.