فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

مقدمه: lncRNA ها در رشد، رونویسی، ترجمه و آپوپتوز سلول نقش دارند. UCA1 نوعی lncRNA مهم است که با پیشرفت سرطان تخمدان ارتباط دارد. بیش از نیمی از زنان مبتلا به سرطان تخمدان در کمتر از پنج سال بعد از تشخیص از بین می روند. هدف از پژوهش حاضر حذف ژن UCA1 (Urothelial Carcinoma Associated 1) با استفاده از روش پیشرفته CRISPR /Cas9 در سلول SK-OV-3 و تعیین اثر آن بر پیشرفت سرطان و آپوپتوز بود.  روش­ کار: ابتدا با نرم افزار CHOPCHOP، دو نوع sgRNA‌ برای UCA1 طراحی شد. این sgRNA‌ ها پس از سنتز، در دو وکتور pSCas9 به صورت جداگانه کلون شدند. سلول­ های SK-OV-3 نیز با دو وکتور حامل sgRNA‌ها، ترانسفکت شدند. پس از تایید عملکرد صحیح CRISPR در این سلول­ ها، بیان ژن­ های BAK ، BAX, P53 و FAS  و آنتی‌آپوپتوزی BCL2 و survivin به روش Real time PCR ارزیابی شد. همچنین میزان تکثیر سلولی و آپوپتوز با متیل تیازول تترازولیوم (MTT) و فلوسیتومتری بررسی شد.یافته ها: نتایج نشان دهنده حذف موفق ژن UCA1 در رده سلولی SK-OV-3 بود. بیان ژن­ های BAK، BAX, P53 و FAS در سلول­ های دستورزی شده نسبت به سلول­ های شاهد، به صورت معناداری افزایش بیان نشان داد (0.05>p). همچنین، کاهش بیان ژن­ های BCL2 و survivin در سلول­ های دچار حذف ژن نسبت به گروه شاهد مشاهده شد (0.05>p). نتایج MTT و فلوسیتومتری حاکی از کاهش تکثیر سلولی و افزایش آپوپتوز بود. نتیجه­ گیری: حذف ژن UCA1 در سلول SK-OV-3، اثرات مثبت در کاهش تکثیر و افزایش آپوپتوز نشان داد، از این رو جلوگیری از بیان این ژن نقش موثری در کنترل رشد سلول­ های سرطان تخمدان دارد.