ارزیابی بیان موقت ژن های AS1 و 4'CGT در ﮔﻠﺒﺮگﻫﺎی بنفشه آفریقایی ﺑﺎ سیستم اﮔﺮواﯾﻨﻔﯿﻠﺘﺮﯾﺸﻦ جهت تولید رنگ جدید در گل
نویسندگان
1 ایران، ساری، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری، پژوهشکده ژنتیک و زیست فناوری طبرستان
2 ایران، زابل، دانشگاه زابل، دانشکده کشاورزی، گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی
3 ایران، گرگان، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، دانشکده تولید گیاهی، گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی
4 ایران، زابل، دانشگاه زابل، دانشکده کشاورزی، گروه گیاهپزشکی
doi
چکیده
تولید ارقام زینتی با رنگهای جدید هدف اصلی در صنعت گل و گیاهان زینتی است. بنفشه آفریقایی از لحاظ تجاری به خوبی شناخته شده و در رنگهای مختلفی به جز گل زرد موجود است. این پژوهش با هدف تغییر رنگ گلبرگهای بنفشه آفریقایی و تولید مسیر بیوسنتزی رنگدانه آئورون از طریق دستورزی ژنتیکی ژنهای AS1 و 4'CGT انجام شد. بدین منظور، این ژنها با استفاده از PCR با آغازگرهای اختصاصی از گلبرگ گل میمون زرد جداسازی و بترتیب در ناقل بیانی pCAMBIA1304 وpBI121 اتصال گردید. پلاسمیدهای نوترکیب4'CGT +pBI121 وAS1 pCAMBIA1304+ با استفاده از بررسیهای Colony PCR، هضم آنزیم، توالییابی و همردیف سازی آنها در بانک اطلاعاتی، مورد تایید قرار گرفت. سپس به روش الکتروپوریشن به آگروباکتریوم سویه LBA4404 منتقل و با استفاده از سیستم بیان موقت در گلبرگهای گیاه بنفشه آفریقایی مورد بررسی قرار گرفت. در این سیستم سوسپانسیون آگروباکتریوم حامل سازه ژنی با استفاده از سرنگ در پایه گلبرگها تزریق شد. نتایج مورفولوژیکی پس از 3 روز به وضوح تغییر رنگ گلبرگهای سفید به زرد کم رنگ را نشان داد و هیچ تغییری در گلبرگهای شاهد مشاهده نشد. آنالیزPCR و مشاهده با میکروسکوپ نوری بترتیب بیان ژن وتغییرات فنوتیپی را تایید کردند. همچنین آئوروسیدین-6-او- گلوکزید (AOG) با استفاده از HPLC-DAD-MSn در گلبرگهای تراریخت شناسایی شد. با بکارگیری این سیستم میتوان سازه ژنی را با اعتماد بیشتری برای تراریختگی دائم به گیاهان زینتی انتقال داد. همچنین این پژوهش میتواند راهی را برای مهندسی ایجاد رنگ زرد در گونههای گیاهان زینتی که فاقد این نوع رنگ هستند باز نماید.