استخراج و تخلیص آنزیم لیپاز (EC 3.1.1.3) از روده ماهی هوور مسقطی (Katsuwenus pelamis)
نویسندگان
1 نویسنده مسئول، پژوهشکده اکولوژی خلیجفارس و دریای عمان، موسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، بندرعباس، ایران
2 مرکز تحقیقات زیستشناسی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران
doi
10.22069/japu.2023.21688.1812چکیده
حدود 7 تا 8 درصد وزن بدن تون ماهیان را مجاری گوارشی تشکیل می دهد و به عنوان یک منبع اقتصادی برای استخراج آنزیم لیپاز میباشد. استخراج آنزیم با استفاده از بافر تریس هیدروکلرید (25 میلی مولار با pH؛ 8/7)، انجام شد. سپس عصاره خام در محدوده اشباع بین 30، 45 و 60 درصد سولفات آمونیوم رسوب کرده و دیالیز گردید. برای خالص سازی بیشتر از کروماتوگرافی تبادل یونی با استفاده از ستون DEAE-Cellulose با ابعاد (30 × 5/2 سانتی متر) و کروماتوگرافی فیلتراسیون ژل توسط ستون Sephadex G-100 (80×8/1 سانتی متر) استفاده شد. آنزیم های لیپاز خالص شده حاصل از ترسیب با سولفات آمونیوم 30، 45 و 60 درصد به ترتیب دارای وزن مولکولی (3/68، 41/38 و ND کیلودالتون)، pH (1/7، 9/6 و 4/7)، دمای بهینه (55، 42 و 38 درجه سانتی گراد) و فعالیت ویژه آنزیمی (42/3، 8/2 و U/mg 1/4) با استفاده از پارانیتروفنیل پالمیتات (pNPP) به عنوان سوبسترا بود. نتایج بیانگر امکان استخراج و تخلیص آنزیم لیپاز از دستگاه گوارش آبزیان با ویژگی های بیوشیمیایی مناسب جهت استفاده در صنایع شیمیایی و غذایی می باشد.