تأثیر لامینین و ماتریژل بر کلونی زایی سلول های بنیادی منجمد- ذوب شده اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه
نویسندگان
1
2
3
doi
10.32592/jru.8.1.45چکیده
سابقه و هدف: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی به عنوان سرمنشأ فرایند اسپرماتوژنز تنها سلول های بنیادی بالغین هستند که علاوه بر تکثیر و خودنوزایی، قدرت انتقال اطلاعات ژنتیکی به نسل بعد را دارند . این سلول ها جایگاه مهمی در طب تولیدمثل، درمان انواع ناباروری و سرطان ها دارند. تکثیر این رده سلولی در محیط آزمایشگاه پیش نیاز تمامی مطالعات مربوط به آن است. هدف از مطالعه حاضر بررسی تأثیر ماتریکس خارج سلولی لامینین و ماتریژل بر القای کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی منجمد- ذوب شده در محیط آزمایشگاه است. مواد و روش ها: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی ( SSCs ) از بیضه بره جـدا و به روش حذف تمایزی خالص سازی شدند. سپس بعد از انجماد و یخ گشایی در 3 گروه آزمایشی شامل گروه شاهد (کشت ساده سلول ها در محیط پایه: DMEM حاوی 1 درصد آنتی بیوتیک و 5 درصد سرم گوساله جنین ( FBS ) ، تیمار 1 (کشت بر روی لامینین) و تیمار 2 (کشت بر روی ماتریژل) به مدت 10 روز کشت داده شدند. تعداد و مساحت کلونی ها در روزهای چهارم، هفتم و دهم در هر گروه محاسبه شد. نشانگرهای اختصاصی سلول های اسپرماتوگونی ( plzf, ITGA6, PGP9.5, VASA ) نیز با آزمون ایمنوسیتوشیمی ارزیابی شدند. یافته ها: تعداد کلونی های تشکیل شده در گروه لامینین ( 6.2 ± 118.92) به طور معنی داری بیشتر از گروه شاهد (3.8±78.08) و ماتریژل (4.3 ± 95.00) است (0.05 P≤ ). همچنین، مساحت کلونی در گروه لامینین ( mm 2 0.30 ± 1.37) و ماتریژل ( mm 2 0.38 ± 1.97) به طور معنی داری بیشتر از گروه شاهد ( mm 2 08 .0 ± 0.59) است (0.05 P≤ ). نتیجه گیری: استفاده از ماتریکس برون سلولی لامینین در کشت سلول های اسپرماتوگونی در مقایسه با ماتریژل و کشت ساده بـه صـورت معنـی داری موجـب افزایش قدرت کلونی زایی سلول های منجمد اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه می شود.