شناسایی سریع سالمونلاهای تیفوئیدی و غیرتیفوئیدی در نمونههای طیور صنعتی با استفاده از روش واکنش زنجیرهای پلیمراز چندگانه (multiplex-PCR)
نویسندگان
1 -دانشیار گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، علوم پزشکی تبریز، دانشگاه آزاد اسلامی، تبریز، ایران.-گروه بیوتکنولوژی میکروبی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، واحد تبریز، دانشگاه آزاد اسلامی، تبریز، ایران.
2 دانش آموخته کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد تبریز، دانشگاه آزاد اسلامی، تبریز، ایران.
doi
10.30495/jcp.2023.22822چکیده
شناسایی سروتیپهای سالمونلا در نمونههای طیور صنعتی، با استفاده از روش های سنتی میکروبیولوژیکی انجام می شود که سبب مشکلاتی در تشخیص دقیق و بهموقع آنها میشود، اما روش های تشخیص مولکولی این مشکلات را تا حدودی رفع کردهاست. هدف از انجام مطالعهحاضر، ارزیابی امکان شناسائی سریع سالمونلا های تیفوئیدی و غیرتیفوئیدی در نمونه های طیور، با استفاده از روشmultiplex-PCR بود. 40 سالمونلای مربوط به نمونه های طیورصنعتی از آزمایشگاه های دامپزشکی شهر تبریز تهیهشد. بعد از انجام آزمایشات افتراقی و سرولوژیکی لازم، از بین40جدایه مذکور، تعداد 15جدایهء سالمونلاگالیناروم، 7جدایهء سالمونلاانتریتیدیس، 2جدایهء سالمونلاتایفی موریوم و 3جدایهء سالمونلاپولوروم تشخیص داده شد. 13جدایه متعلق به سالمونلاانتریکا نبودند. در ادامه با استفاده از پرایمرهای اختصاصی، جهت تکثیر ژن های invA، rfbJ، lygD، I137_08605 و speCو بهکمک روشmultiplex-PCR ، جدایههای فوق از لحاظ ژنوتیپی بررسی شدند. یافته ها نشان داد که همه 27جدایه به همراه سوشهای استاندارد هر 4سروتیپ مذکور، ژن اختصاصی مشترک invA را دارا هستند. همچنین مشخص شد که ژن I137_08605 در همه جدایه ها و سوشهای استاندارد سروتیپ های سالمونلاگالیناروم و سالمونلا پولوروم، ژن های rfbJ و lygD در همه جدایه ها و نیز سوشهای استاندارد سالمونلاانتریتیدیس و سالمونلا تایفی موریوم و ژن speC در همه جدایه های سالمونلا گالیناروم و برخی ازجدایه ها و سوشهای استاندارد سالمونلاانتریتیدیس و سالمونلاتایفی موریوم حضور دارند. به نظر می رسد روشmultiplex-PCR ، سالمونلاگالیناروم و سالمونلا پولوروم را از همدیگر و از متداول ترین سالمونلاهای غیر تیفوئیدی طیور تشخیص داد که با جلوگیری از اشاعه بیشترآن ها، سبب جلوگیری از خسارت به صنعت طیور شود.