مقایسه روش PCR-RFLP با روشهای بیوشیمیایی در تشخیص عوامل سل ریوی انسانی
نویسندگان
1 دانشگاه علوم پزشکی اراک، گروه بیماریهای عفونی و گرمسیری
2 دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران ،گروه زیست شناسی
3 باشگاه پژوهشگران جوان دانشگاه آزاد اسلامی، واحد اراک
4 موسسه واکسن و سرم سازی رازی کرج، بخش تولید و تحقیق توبرکولین و مالئین
5 دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، گروه میکروبیولوژی
6 دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، گروه میکروبیولوژی
7 موسسه واکسن و سرم سازی رازی کرج، بخش تولید و تحقیق توبرکولین و مالئین
8 موسسه واکسن و سرم سازی رازی کرج، بخش تولید و تحقیق توبرکولین و مالئین
doi
چکیده
سابقه و هدف: بیماری سل هنوز هم یکی از مهمترین عوامل مرگ و میر در بسیاری از کشورها است. کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس از مجموعهای از باکتریها با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده است که با توجه به طولانی بودن زمان کشت تعیین هویت آنها بسیار مشکل است. هدف از این پژوهش، ارزیابی روش PCR-RFLP برای افتراق مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس و مایکوباکتریوم بویس و مقایسه نتایج آن با آزمونهای بیوشیمیایی است. مواد و روشها: 68 نمونه خلط از بیماران سل ریوی با اسمیر مثبت از مراکز بهداشتی و درمانی استان مرکزی جمع آوری و در محیط کشتهای اختصاصی کشت شد. همچنین 10 جدایه مایکوباکتریوم بویس مربوط به مناطق مختلف ایران و 6 سویه استاندارد مایکوباکتریوم برای مقایسه استفاده گردید. پس از انجام تستهای بیوشیمیایی، آزمون PCR براساس ژن کاذب oxyR انجام گرفت. سپس الگوی برش محصول تکثیر یافته با استفاده از آنزیم AluI مورد ارزیابی قرار گرفت. یافتهها: در همه جدایههای انسانی مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس یک قطعه و در جدایههای گاوی 3 قطعه پس از برش توسط آنزیم مشاهده شد. از نمونههای مورد پژوهش تنها در یک مورد مایکوباکتریوم بویس تشخیص داده شد. همچنین نتایج حاصل از آزمون PCR-RFLP با نتایج حاصل از تستهای بیوشیمیایی هماهنگی 100% داشت. نتیجه گیری: روش PCR-RFLP روشی سریع و دقیق بهمنظور افتراق مایکوباکتریوم بویس از سایر اعضای کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس میباشد و میتواند در تشخیص اولیه و درمان مورد استفاده قرار گرفت.
