فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

سابقه و هدف: ویروس آنفولانزا یکی از مهمترین عوامل مرگ و میر طیور بر اثر بیماریهای تنفسی است که سالیانه خسارات زیادی را به صنعت پرورش طیور در سراسردنیا وارد می‌کند.پروتین هماگلوتینین(HA) از عوامل اصلی در بیماری‌زایی این ویروس است لذا هدف از پژوهش حاضر کلون کردن و بیان این ژن در سلول Sf9 با استفاده از باکولوویروس می‌باشد.مواد و روشها: بعد از جداسازی ژنوم ویروس آنفولانزا H9N2، ژنHA توسط پرایمرهای اختصاصی با روشهایRT-PCR و PCR تکثیر و با کمک وکتورpFastBac Dual به بکمید منتقل گردید. بکمید نوترکیب واجد ژن HA به سلول میزبانDH10Bac انتقال داده شد. با ترانسفکت کردن سلولSf9 با بکمید نوترکیب، چگونگی بیان و میزان بیان پروتین نوترکیب با روشهای SDS-PAGE، western blotting و بردفورد بررسی شد.یافتهها: پروتین حاصل از بکمید نوترکیب با استفاده ازSDS PAGE بررسی و خلوص آن تائید شد. غلظت پروتین نوترکیب در محلول رویی سلولهایSf9 آلوده به ویروس نوترکیب µg/ml 138 تخمین و توسطwestern blotting تائید شد.نتیجهگیری: در تحقیق حاضر ژن HA بر روی وکتورPfastBacDual با موفقیت کلون شد و بعد از انتقال بر روی بکمید و ترانسفکت به سلولSf9 بیان مناسبی از ژن در محلول رویی سلولهایSf9 بدست آمد. با انجام آزمایشهای حیوانی، این پروتین میتواند به عنوان واکسن نوترکیب بر علیه آنفولانزا H9N2 مورد استفاده قرار گیرد.