فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

سابقه و هدف: استرپتوکوکوس پیوژنز (گروه A، GAS) عامل طیف وسیعی از عفونت‌ها می باشد. همچنین، تب حاد روماتیسمی و گلومرولونفریت حاد نیز به دنبال عفونت های گروه A استرپتوکوک ها بروز می کنند. مطالعات متعددی نشان داده اند که بیان ژن Spy مربوط به استرپتوکوکوس پیوژنز در بروز ایمونوژنیسیته و عفونت های وخیم افزایش دارد. هدف از مطالعه حاضر کلونینگ و بیان ژن S py در سلول مستعد Origami به منظور تهیه واکسنی برای این عفونت در آینده بوده است. مواد و روش ها: در این مطالعه توصیفی-مقطعی، تعداد 100 سواب حلق از بیماران مراجعه کننده به درمانگاه های شهر تهران در شرایط استریل جمع آوری به آزمایشگاه منتقل شد. جداسازی سویه ها با روش های میکروبیولوژی انجام شد. پس از استخراج DNA و انجام آزمون PCR به منظور ردیابی ژن Spy ، کلونینگ در وکتور اشریشیا کلی اوریگامی و پلاسمید pET-26b انجام شد. کلونال سلکشن و PCR کلونی، آزمون Real-Time PCR به منظور بررسی صحت کلونینگ انجام گردید. یافته ها: از مجموع 12 سویه استرپتوکوکوس پیوژنز ، 11 جدایه حامل ژن Spy بودند. برش آنزیمی پلاسمید pET-26 b و کلونینگ در وکتور بیانی اشریشیا کلی اوریگامی موفقیت آمیز بود. همچنین Ct سلول کلون شده در مقایسه با کنترل داخلی فاقد کلون، نشان دهنده بیان موفقیت آمیز بیان مناسب ژن Spy می باشد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه بیان مناسب ژن Spy در روش کلونینگ در وکتور اشریشیا کلی اوریگامی و پلاسمید pET-26b بود و تایید این نتایج با روش Real-Time PCR را نشان می دهد.