ردیابی مولکولی انواع ژن های Cry در جدایه¬های بومی باکتری Bacillus thuringiensis جداسازی شده از خاک های مزارع توتون استان های مازندران و گلستان

نویسندگان

1 محقق گروه بیوتکنولوژی مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش

doi
چکیده

در سال­های اخیر، استفاده مداوم از سموم شیمیایی، موجب بروز مقاومت در آفات و آلودگی­های زیست­محیطی شده است. از این­رو، نیاز به کاربرد حشره­کش­های سازگار با محیط و ایمن، ضرورت یافته است. یکی از موفق­ترین عوامل میکروبی در این زمینه، باکتری Bacillus thuringiensis (Bt) است. باکتری  Btگرم­مثبت، هوازی، خاکزی و اسپور­زا است و پس از اسپور­زایی، پروتئین­های کریستال تشکیل می­دهد که توسط ژن­های Cry رمز­گذاری می­شوند. بدین منظور در این تحقیق، تعداد 90 جدایه بومی باکتری Bt از خاک­های مزارع توتون استان­های مازندران و گلستان، جداسازی و بررسی مولکولی جدایه­ها بر اساس ژن Cry ، بر اساس روش PCR با استفاده از 7 جفت آغازگر اختصاصـی بـرای ژن­های Cry I ، Cry 1Ab ، Cry 1Ac ، Cry 1F ، Cry 1I ، Cry 2  و Cry 9 صورت گرفت. نتایج بررسی باند­های به­دست آمده نشان داد که فراوانی ژن­های مورد نظر در جدایه­های مختلف، بسیار متفاوت بود؛ به­طوری­که برخی از ژن­ها مانند Cry 1Ab بیشترین فراوانی را در جدایه­های مورد بررسی داشتند، ولی ژن­های Cry I و Cry 1I دارای کمترین فراوانی بودند. در برخی از جدایه­ها، ژن­ها در اندازه­های متفاوت­تر از سطح مورد انتظار، تکثیر شدند. نتایج این تحقیق، می­تواند برای ردیابی جدایه­های بومی Bt دارای ژن­های Cry مؤثر روی حشرات، مفید واقع شود.