اثر ملاتونین بر قطر کلونیها، سطح آپوپتوزیس و بیان ژنهای وابسته به آپوپتوزیس در سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند
نویسندگان
1 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.
2 گروه آناتومی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
3 گروه علوم درمانگاهی،دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی ، واحد علوم و تحقیقات، تهران ، ایران
4 گروه مامایی و بیماریهای تولیدمثل دام، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران.
5 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی ، واحد علوم و تحقیقات، تهران ، ایران
doi
10.22092/vj.2022.358716.1975چکیده
هدف از اجرای این تحقیق بررسی اثر ملاتونین بر قطر کلونیها، سطح آپوپتوزیس و بیان ژنهای مرتبط با آپوپتوزیس در سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند بوده است. سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی موجود در غشاء پایه لولههای منیساز از بیضه گوسفند نژاد افشاری با استفاده از مراحل هضم آنزیمی جداسازی شدند. نمونهها به چهار گروه تقسیم شدند. گروه شاهد شامل محیط پایه بود و در سه گروه بعدی به ترتیب تیمارهای H2O2 (30 میکرومولار)، ملاتونین (1 نانو مول) و ملاتونین+H2O2 (30 میکرومولار H2O2 به همراه 1 نانو مول ملاتونین) به محیط پایه اضافه شدند. سلولها به مدت سه هفته کشت داده شدند و قطر کلونیها در روزهای پنج و 14 و 21 پس از شروع کشت ارزیابی شدند. پس از پایان دوره کشت میزان آپوپتوزیس و بیان ژنهای مرتبط با آپوپتوزیس (BAX و BCL2) نیز ارزیابی شد. در روز 5 و 14 کشت، قطر کلونیهای اسپرماتوگونی در گروههای شاهد و ملاتونین نسبت به دو گروه دیگر بیشتر بود (05/0≥P). در روز 21 کشت، بیشترین و کمترین قطر کلونیهای اسپرماتوگونی بهترتیب در گروههای ملاتونین و H2O2 مشاهده شد (05/0≥P). کمترین و بیشترین درصد سلولهای آپوپتوتیک و همچنین بیان ژن BAX و مقدار نسبت BAX/BCL2 بهترتیب در گروههای ملاتونین و H2O2 یافت شد (05/0≥P). همچنین بیشترین مقدار بیان ژن BCL2 در سلولهای اسپرماتوگونی گروه ملاتونین دیده شد (05/0≥P). در نتیجه استفاده از ملاتونین در محیط کشت میتواند روشی مفید در برای بهبود کیفیت و کاهش بروز آپوپتوزیس در سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند باشد.