جداسازی و شناسایی باکتریهای اندوفیت از ریشه گیاه یونجه و بررسی اثرات ضد میکروبی آنها بر پاتوژنهای انسانی
نویسندگان
1 دانشجوی کارشناسی، گروه میکروبیولوژی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران
2 دکتری، گروه میکروبیولوژی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران
doi
چکیده
هدف: یونجه با نام علمی Medicago sativa مهمترین گیاه علوفهای در ایران و بسیاری از نقاط جهان است. این گیاه به دلیل داشتن ارزش غذایی بالا و امکان کاشت در اقلیمهای مختلف، به ملکه گیاهان علوفهای مشهور است. هدف پژوهش حاضر جداسازی و شناسایی باکتریهای اندوفیت از ریشه گیاه یونجه و بررسی اثرات آنتاگونیستی آنها بر باکتریهای بیماریزای انسانی است.مواد و روشها: قطعههای ریشه ضدعفونی شده گیاه یونجه پس از له شدن در محیطهای کشت مایع تایوگلی کولات براث و مولر هینتون براث، جهت غنیسازی، کشت داده شدند. پس از کشتهای مایع، بر روی محیطهای کشت مولر هینتون آگار، ائوزین متیلن بلو و مک کانکی آگار کشت انجام شد. باکتریهای اندوفیت با روش رنگآمیزی گرم و تستهای بیوشیمیایی، مورد شناسایی قرار گرفتند. فعالیت آنتاگونیستی باکتریهای جدا شده به روشهای استریک متقاطع و دولایهای بررسی گردید. از باکتریهای دارای اثرات آنتاگونیستی، استخراج DNA انجام شد و با کاربرد پرایمر یونیورسال، تکثیر ژن SrRNA16 صورت پذیرفت. محصول PCR تعیین توالی شده و درخت فیلوژنی رسم گردید.یافتهها: نتایج نشان داد باکتریهای اندوفیت یونجه دارای فعالیت آنتاگونیستی بودند و در نهایت دو اندوفیت از لحاظ هویت مولکولی مورد بررسی قرار گرفتند که متعلق به جنسهای انتروباکتر و سودوموناس بودند.نتیجهگیری: براساس نتایج حاصل، باکتریهای اندوفیت دارای تنوع زیاد و اثرات قابل توجه ضد باکتریایی میباشند.