بررسی اثر ضدسرطانی لانتیبیوتیک Lacticin 3147
نویسندگان
doi
10.22038/mjms.2022.22573چکیده
مقدمه بیشترین نوع سرطان مربوط به سرطان پوست بخصوص در مردان است. Lacticin 3147، باکتریوسینی از خانواده لانتیبیوتیکهاست. هرچند هنوز شواهدی برای اثرات ضدسرطانی آن گزارش نشده است، به دلیل مشابهت به نایسین برای بررسی این اثر درنظر گرفته شد. هدف بررسی اثر Lacticin 3147 بود. روش کار ابتدا سلولهای A431 کشت داده شدند و سنجش بقای سلولی و میزان سمیت سلولی Lacticin 3147 بر سلولهای کارسینومای اپیدرموئید انسانی A431 پس از 24 و 48 ساعت تیمار توسط روش رنگ سنجی MTT Assay بررسی شد. آپوپتوز سلولی با سنجش فعالیت کاسپازهای 8 و 9 در سلولهای سرطانی A431 تیمار شده با غلظت IC 50 Lacticin 3147 پس از 24، 48 و 72 ساعت بررسی شد. از روش Boyden Chamber جهت ارزیابی توانایی تهاجم سلولهای سرطانی A431 تیمار شده با دوز زیرکشنده Lacticin 3147 استفاده شد. آغازگرهای اختصاصی برای ژنهای پروآپوپتوتیک Bax ، آنتیآپوپتوتیک Bcl-2 و ژن مرجع ꞵ -actin طراحی و میزان بیان آنها درسلولهای A431 تیمار شده با غلظت IC 50 Lacticin 3147 با استفاده از روش Real Time PCR کمی، مورد بررسی قرار گرفت. تجزیه و تحلیل دادهها توسط نرمافزار SPSS 16 و آزمون آماری ANOVA انجام گردید ( 05/0(P<. نتایج بررسی آماری دادههای بهدست آمده از آزمون MTTنشان داد که رشد سلولهای تیمار شده با غلظتهای مختلف Lacticin 3147 بهطور معنیداری کاهش پیدا کرده است (001/ 0p<). تأثیر مهاری Lacticin 3147 بر زندهمانی سلولهای A431 وابسته به غلظت و زمان تیمار است. بهطوریکه بیشترین تأثیر درغلظت µM 3/0 و مدت 72 ساعت مشاهده شد. غلظت IC 50 Lacticin 3147 برابر باµM 8/0 بهدست آمد. فعالیت کاسپازهای 8 و 9 در سلولهای سرطانی A431 تیمار شده به صورت وابسته به زمان افزایش یافت و پس از 72 ساعت نسبت به کنترل بهترتیب 36/2 و 72/2 برابر شد (001/ 0p<). توان تهاجم سلولهای سرطانی A431 تیمار شده با دوز زیرکشنده Lacticin 3147 بهطور وابسته به دوز کاهش یافت و در غلظتµM 5/0 با حداقل اثر کشندگی، کمترین توان تهاجم را نشان داد (001/0>p). نتیجه گیری بیان ژن پروآپوپتوتیک Bax در سلولهایA431 تیمار شده با غلظت IC 50 Lacticin 3147 بهطور قابل ملاحظهای (001/0>p) افزایش یافت. همچنین کاهش بیان ژن آنتیآپوپتوتیک Bcl-2 در همان شرایط معنیدار بود. درنتیجه، استفاده از Lacticin 3147 در آینده ممکن است به یک استراتژی جدید برای درمان سرطان پوست منجر شود.