ارزیابی آنتی ژن های خام پروتواسکولکس و مایع کیست هیداتیک برای تشخیص سرولوژیکی هیداتیدوز در گوسفند با استفاده از روش های ایمونوبلاتینگ
نویسندگان
1
2
3
4
doi
چکیده
هیداتیدوزیس یک بیماری شایع مشترک بین انسان و حیوان است و روشهاي متعدد سرمي، جهت تشخيص هيداتيدوز وجود دارد که روشهای ایمنوبلاتینگ از روشهای حساس و با ويژگـي بـالا میباشند. لذا در این مطالعه، به منظور تعیین آنتیژن مناسب، جهت بررسیهای سرولوژیک با توجه به سویه منطقه، آنتيژنهاي پروتواسکولکس و مایع کيست هيداتيک گوسفندی با استفاده از روشهای داتبلات و وسترنبلات ارزیابی شد. در این بررسی تجربی، 40 نمونه گوسفندان آلوده و غیرآلوده به کیست هیداتیک از کشتارگاه اردبیل جمعآوری شد که با معاینه پس از مرگ تایید شد. منبع آنتیژن، برای آزمایشات سرولوژیک، مایع خام کیست هیداتیک و پروتواسکولکسهای جمعآوری شده از گوسفندان آلوده به طور طبیعی در کشتارگاه اردبیل بود. نمونههای سرم با استفاده از آنتیژنهای نامبرده به روش داتبلات و وسترنبلات مورد آزمایش قرار گرفتند. سرم خون گوسفندان غیرآلوده به عنوان کنترل منفی در این ارزیابی مورد استفاده قرار گرفت. ارزیابی باندها پس از رنگآمیزی با کوماسی بلو در آزمون SDS-PAGE و بعد از مواجهه با سرمهای مثبت و منفی در وسترن بلاتینگ صورت گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که حساسیت آنتیژن مایع و پروتواسکولکس کیست هیداتیک گوسفندی، با روش داتبلات صددرصد میباشد و آنتیژن مایع کیست، در روش وسترنبلات باندهای 20، 23 و 26 کیلودالتون و آنتیژن پروتواسکولکس فقط باند 25 کیلودالتونی را نشان داد و هیچ یک از آنتیژنهای نامبرده با سرم گوسفندان غیرآلوده واکنش مثبت کاذب ندادند. با توجه به نتایج حاصل، هر دو آنتیژن با در نظر گرفتن سویه منطقه، در تشخیص کیست هیداتیک با حساسیت بالا مناسب تشخیص داده شد.