تاثیر رقیق‌کننده‌های لاکتوز، شیر پس‌چرخ و تریس بر روی اسپرماتوزوئیدهای منجمد گاومیش

نویسندگان

1 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی اورمیه ، اورمیه، ایران

2 مرکز پرورش واصلاح نژاد گاومیش ایستگاه جبل اورمیه، اورمیه، ایران

doi
چکیده

ترکیب رقیق‌کننده منی مورد استفاده قبل از انجماد نقش اساسی را در انجماد موفقیت‌آمیز اسپرماتوزوئیدها ایفا می‌کند. هدف از انجام این تحقیق شناسایی محلول بافری مناسب برای انجماد منی گاومیش در ایستگاه پرورش و اصلاح نژاد کشورمی‌باشد. برای این منظور تعداد 16 انزال دو رأس از گاومیش‌های نر مورد آزمایش جمع‌آوری گردید. نمونه‌های منی با کیفیت عالی و با داشتن بیش از 70 درصد اسپرماتوزوئید با تحرک رو به جلو در دمای 37 درجه سانتی‌گراد با سه رقیق کننده مورد نظر تریس، شیر پس‌چرخ و لاکتوز رقیق گردید.نمونه منی رقیق شده پس از طی مرحله خنک کردن (Cooling)در دمای 4 درجه سانتی‌گراد به‌مدت 2 ساعت و نیزاعمال زمان تعادل 6-4 ساعت در دمای 4درجه سانتی‌گراد متعاقب افزودن گلیسرول، در پایوت‌های 5/0 میلی لیتری فرانسویبا اعمال زمان انجماد مشخص قبل از ورود در ازت مایع منجمد گردیدند و در داخل کانتینرهای مخصوص نگه‌داری شدند. پساز گذشت 48 ساعت از زمان انجماد، یخ گشایی (Thawing) نمونه پایوت‌های منجمد مورد نظر در دمای 37 درجه سانتی‌گراد به‌مدت 30 ثانیه صورت گرفت. میزان تحرک و درصد اسپرماتوزوئیدهای با غشای پلاسمالمای سالم و یکپارچه و نیز آکروزوم‌های دست نخورده نمونه‌های مورد آزمایش پس از ذوب به‌ترتیب با استفاده از میکروسکوپ صفحه گرم با دمای 37 درجه سانتی‌گراد، آزمایش HOST و رنگ‌آمیزی گیمسا مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج ارزیابی میزان تحرک اسپرماتوزوئیدهای نمونه‌های منی منجمد تهیه شده بر اساس آزمون آنالیز واریانس نشان داد که درصد تحرک اسپرماتوزوئیدها (میانگین± انحراف معیار) در محیط رقیق‌کننده تریس (6/3±50) بیشتر از شیر پس‌چرخ (5/2±5/44) بوده و در رقیق‌کننده لاکتوز پائین (5/10±4/24) بود (01/0P<). در همین راستا درصد اسپرماتوزوئیدهای با غشای پلاسمالمای سالم و یکپارچهو نیز با آکروزوم دست نخورده برای رقیق‌کننده‌های تریس، شیر پس‌چرخ و نیز لاکتوز مورد نظر به‌ترتیب 2/1±4/41، 8/3±6/32و 4/9±24 ونیز 1/3±0/54، 1/4±4/50 و 2/12±3/27 درصد ثبت گردید (01/0P<). به‌طور کلی نتایج این بررسینشان داد که استفاده از رقیق‌کننده با بافر تریس نسبت به رقیق کننده‌های شیر پس‌چرخ و یا لاکتوز برای انجماد اسپرماتوزوئیدهای گاومیش مناسب و قابل توصیه می‌باشد. تاثیر رقیق‌کننده‌های لاکتوز، شیر پس‌چرخ و تریس بر روی اسپرماتوزوئیدهای منجمد گاومیش