ارزیابی تشخیص سریع و بررسی حضور ژنهای حدت اپرون spv در جدایههای سالمونلا با استفاده از روشهای مولکولی simplexPCR و multiplexPCR
نویسندگان
1 دانشآموخته کارشناسی ارشد رشته ژنتیک، دانشکده علوم پایه، واحد زنجان، دانشگاه آزاد اسلامی، زنجان، ایران.
2 استادیار گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، واحد تبریز، دانشگاه آزاد اسلامی، تبریز، ایران.؛ مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، واحد تبریز، دانشگاه آزاد اسلامی، تبریز، ایران.
3 استادیار گروه زیستشناسی، دانشکده علوم پایه، واحد زنجان، دانشگاه آزاد اسلامی، زنجان، ایران.
doi
10.30495/jvcp.2020.1892589.1257چکیده
امروزه بـرای شناسـایی و تشخیص سروتیپ های سالمونلا در نمونه های بالینی و مواد غذائی از روشهای سنتی تشخیص این باکتری استفاده مـیگـردد که وقت گیر و گاهی مشکل ساز میباشند، اما با کشف روشهای سریع تشخیص مولکولی، این مشکلات تا حد زیادی مرتفع گردیده است. مطالعه حاضر، با هدف تشخیص سریع جدایه های مختلف سالمونلا بر اساس جسجوی ژن کروموزومی invA و نیز شناسائی جدایه های حاد حاوی ژن های حدت اپرون spv انجام گردید. بدین منظور تعداد 20 جدایه انسانی سالمونلا از بیمارستان های شهر تبریز و 20 جدایه این باکتری که از پنیرهای سنتی عرضه شده در بازار مصرف تبریز جدا شده بود، تهیه گردید. ابتدا با استفاده از پرایمر های اختصاصی ژن invA ، تائید مولکولی جدایه ها با استفاده از روشsimplex PCR ارزیابی گردید. در ادامه برای بررسی سویه های حاد باکتری مذکور براساس حضور ژن های اپرون spv، با استفاده از پرایمرهای اختصاصی مربوطه، به روشmultiplex PCR حضور ژن های R، C، B وspvA بررسی شد. یافته ها اولاً نشان دهنده تائید مولکولی همه جدایه ها بود. ثانیاً همه 40 جدایه مورد آزمایش دارای 3 ژن R، C وspvA بوده ولی هیچ کدام از آن ها دارای ژنspv B نبودند. به نظر می رسد که با توجه به محدودیت ها و مشکلات موجود در روش بررسی آزمایشگاهی سنتی سالمونلاها، می توان ازPCR به عنوان روشی سریع در تشخیص آلودگی به باکتری سالمونلا استفاده کرد. همچنین بایستی وجود 3 ژن از 4 ژن حدت اپرون spv در جدایه های مختلف سالمونلا در منطقه تبریز را یافته ای نامطلوب تلقی کرد که لزوم رعایت بیشتر اصول کنترل و پیشگیری در جوامع دامی و انسانی را تاکید می کند.