فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

متیونیناز آنزيمي است که در زمینه ی داروسازی به ویژه کانسرتراپی بسيار مورد مطالعه قرار گرفته است.  باسیلوس های هالوفیلیک گروهي از باکتری های گرم مثبتی هستند که در محیط نمکی زندگی می کنند. این ارگانیسم ها مخازن بالقوه آنزیم هایی هستند که به وفور در صنایع مختلف کاربرد دارند. از این رو هدف این مطالعه بررسی مولکولی و همسان سازی ژن متیونیناز از باسیلوس های هالوفیل در سلول مستعد جهت استفاده در صنعت می باشد. سویه های جنس باسیلوس از مجموع 20 نمونه آب شور از بندرعباس-خليج فارس جداسازی و تعیین هویت شدند و سپس با روش PCRّ، ژن متیونیناز از این باسیلوس ها جدا گردید. قطعه تکثیر یافته توسط روش TA کلونینگ به وکتور انتقالی pTG19  وارد شد. در مرحله بعد وکتور نوترکیب به اشرشیا اوریگامی استاندارد ترانسفورم شد از 12 سویه باسیلوس جدا شده تنها 2 سویه واجد ژن متیونیناز بود. به منظور تعیین هویت مولکولی جنس باسیلوس حامل ژن متیونیناز از پرایمر خانه دار استفاده گردید. در نهایت با سکانس محصول PCR بیان ژن متيونيناز در باکتری اشریشیاکلی اوريگامي تایید شد. بیان آنزیم متيونيناز با استفاده از روش real-time PCR ارزیابی شد. در نتیجه این پژوهش موفق به پیدا کردن باسیلوس های هالوفیل بومی مولد آنزیم متیونیناز شده و ژن آن با موفقیت از باکتری باسیلوس سوبتليس به باکتری اشرشیا اوریگامی به منظور بازدهی تولید بالا، وارد گردید که طبق نتایج، بهینه دمایی فعالیت آنزیم در دمای 37 درجه بود.