بررسی واکنش پذیری آنتی ژن نوترکیب OMP31 باکتری بروسلا با سرم بیماران مبتلا به بروسلوز جهت استفاده در تشخیص به روش الایزا
نویسندگان
1 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی زنجان
2 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی زنجان
3 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی زنجان
4 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی زنجان
doi
https://doi.org/10.82311/qjaphd.2025.1211201چکیده
زمینه و هدف: بروسلوز یا تب مالت یک عفونت زئونوتیک باکتریایی با گسترش جهانی است که توسط گونه بروسلا ایجاد میشود. علائم بارز این بیماری شامل تب در انسان و سقط در حیوانات آلوده میباشد. گام اساسی در کنترل این بیماری ، شناسایی صحیح و به موقع است؛ بنابر این توسعه روشهای تشخیصی کارآمد حائز اهمیت است. در این مطالعه از تست الایزا بر پایه پروتئین نوترکیب OMP 31 استفاده شده است که با استناد به تحقیقات پیشین ، یک پروتئین ایمونوژن با توانایی تحریک پاسخ ایمنی و تولید آنتیبادی مناسب میباشد. هدف از این تحقیق بررسی میزان واکنش پذیری این پروتئین با آنتیبادیهای IgG و IgM موجود در سرم بیماران است. مواد و روشها: کاست ژنی طراحیشده در وکتور pET-28a کلون شد و به باکتری E.coli BL21(DE3) انتقال داده شد. بعد از تایید حضور پروتئین به روش وسترن بلات ، تخلیص پروتئینی به روش کروماتوگرافی میل ترکیبی انجام شد. پس از تعیین غلظت، آنتی ژن بر روی پلیت الایزا کوت شده و واکنش پذیری آن با سرم بیماران و سرم گروه کنترل ، مورد بررسی قرار گرفت. حساسیت و دقت برای هر دو نوع آنتیبادی IgM و IgG توسط آنالیز ROC ارزیابی شد.. نتایج: پس از بیان پروتئین ، حضور پروتئین OMP31 نوترکیب توسط وسترن بلات تایید شده و غلظت آن به کمک آزمون بردفور37/54 میکروگرم بر میلی لیتر تخمین زده شد. حساسیت و اختصاصیت واکنش پروتئین نوترکیب با IgG و IgM موجود در سرم افراد بیمار و سالم به ترتیب 56/56 و %5/72 برای IgG ؛ و %7/75 و 79/62 برای IgM گزارش شد. نتیجه گیری: به نظر می رسد پروتئین نوترکیب تولید شده ، قادر به واکنش مناسبی با سرم بیماران بوده و تفاوت معناداری در میزان واکنش پذیری آن با گروه بیمار و گروه کنترل مشاهده شد.