فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

هدف از این پژوهش، بررسی جایگیری cDNA PPARγ1موشدر پلاسمید بیانی pEGFP-C1 در هسته سلول مورد مطالعه ( فیبروبلاست گاوی) با استفاده از رد یابی مارکر فلورسنتی سبز EGFP می باشد. برای بررسی الگوی بیان و جهت گیری cDNA PPARγ1 درون هسته سلول‌های فیبروبلاست گاوی، پس از تکثیر و کلون نمودن آندر پلاسمید بیانی مناسب pEGFP-C1 سلول‌ها با µg 2.4 پلاسمید و µl 6 Lipofectamine 2000 ترانسفکت شدند. مارکر EGFP که به صورت فیوز شده باcDNA PPARγ1بیان می‌شود، برای رد یابی استفاده شد. با ترانسفکت نمودن سلول‌های فیبروبلاست گاوی، پروتئین حاصله عمدتا وارد هسته ها گردید. همان طور که انتظار می رفت، cDNA ژن PPARγ1 موشی کلون گردیده متصل به ژن گزارشگر فلورسنت سبز با موفقیت بیان شده و پروتئین حاصله عمدتا به داخل هسته سلول‌های مورد مطالعه، وارد شده است. بنابراین می‌توان از پلاسمید نوترکیب حاصله برای مطالعات بیشتر جهت بررسی وظیفه ژن PPARγ1 بهره برد و اتصال EGFP به PPARγ1 مانع از جهت یابی داخل سلولی PPARγ1 نمی شود.