طراحی یک روش الایزای غیرمستقیم جهت غربالگری اسبها بر اساس توانمندی تولید آنتی ونوم اختصاصی علیه کفچه مار ایرانی
نویسندگان
1 بخش تحقیق و تولید سرم های درمانی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران.
doi
10.22092/vj.2021.354846.1861چکیده
در این مطالعه یک روش الایزای غیرمستقیم طراحی گردید تا تیتر آنتیبادی تولید شده در برابر سم مار کبری پس از هر مرحله تزریق اسب مورد سنجش قرار گیرد. به منظور ایمنسازی اسبها از فراکسیونهای سمی زهر مار ناجا ناجا اکسیانا به عنوان آنتیژن استفاده شد. این روش امکان آن را فراهم میکند که بتوان افزایش مقدار آنتیبادی در پاسخ به تزریق سم را مورد بررسی قرار داد و از این طریق کارایی فرآیند ایمنسازی را ارزیابی کرد. به منظور طراحی الایزای غیرمستقیم، رقتهای 50/1، 500/1 و 1000/1 از سرم کنترل مثبت و سرم کنترل منفی برعلیه غلظتهای 5/0، 1 و µg/well 2 از سم استفاده شد. غلظت µg/well 2 از سم و رقت 1:1000 از سرم برای ارزیابی آنتی ونوم انتخاب گردید. پس از راهاندازی سیستم الایزا، سرمهای حاصل از خونگیری اسبها مرحله به مرحله پس از تزریق سم مورد آزمایش قرار گرفت تا روند افزایش تیتر آنتی ونوم مورد ارزیابی قرار گیرد. میانگین جذب نوری سرمها پس از تزریق سوم 213/1 بود؛ این مقدار 8/5 برابر میانگین جذب نوری نمونهها پس از مرحله اول ایمنسازی است. تمامی اسبها پس از تزریق پنجم به تیتر مناسبی از آنتی ونوم رسیدند. نتایج بدست آمده نشان داد که الایزای طراحی شده میتواند برای سنجش مقدار آنتی ونوم سرمی اسبها به ویژه در ابتدای ایمنسازی مورد استفاده قرار گیرد.