ارزیابی سوبستراهای سلولی مورد استفاده در تحقیق و تولید فرآورده‌های بیولوژیک از نظر آلودگی به ویروس های BVD 1&2

نویسندگان

1 موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

2 موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

3 موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

doi
10.22092/vj.2020.351820.1763
چکیده

همزمان با گسترش تولید واکسن بر روی محیط‌های کشت سلولی، شناسایی و از بین بردن ویروس‌های ناخواسته آلوده‌کننده محیط‌های کشت با منشاء حیوانی، و همچنین پیشگیری از آلودگی فرآورده بیولوژیک ناشی ازمحیط‌های کشت سلولی به یکی از دغدغه‌های اصلی تولید‌کنندگان واکسن تبدیل شده است. این مطالعه با هدف بررسی آلودگی احتمالی سوبستراهای سلولی مورد مصرف در تحقیق و تولید فراورده‌های بیولوژیک موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی به ویروس‌های BVD1 و BVD2 انجام شد. در این پژوهش از تعداد 44 لاین سلولی با شماره‌های پاساژ و تاریخ های ذخیره‌سازی مختلف در مجموع 100 نمونه مورد بررسی قرار گرفت. پس از استخراج RNA از سلول‌های فوق، ابتدا با استفاده از روش Real Time PCR و بکارگیری یک جفت پرایمر برای شناسایی تمامی Pestivirus، آزمایش غربالگری انجام شد. در این آزمایش از بیوتایپ سایتوپاتیک NADL BVDV1a بعنوان کنترل مثبت استفاده شد. سپس به روش RT- PCR  گونه و زیرگونه آن‌ها تعیین شد. آلودگی در پنج سلول Hek293, IBRS2(BA F/9), RBK, FLK, RK13 دیده شد که همه سلول‌ها بجز IBRS2 در تایپینگ از نوع BVDV1b بودند. تمام سلول‌های مذکور در تحقیق و کنترل کیفی فراورده‌های بیولوژیک کاربرد دارند.