طراحى سیستم الایزا جهت سنجش پادتن تولید شده در خوکچه هندى ایمن شده با ویروس تببرفکى
نویسندگان
1 گروه زیست شناسی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
2 بخش پروتومیکس و بیوشیمی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی )تات(، کرج، ایران
3 بخش پروتومیکس و بیوشیمی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی )تات(، کرج، ایران
4 گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران، ایران
5 بخش پروتومیکس و بیوشیمی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی )تات(، کرج، ایران
doi
10.22092/vj.2020.128741.1670چکیده
تببرفکی، بیماری عفونی و کشنده ویروسی است که موجب بیمار شدن حیوانات زوج سم میشود. در حال حاضر از روش خنثیسازی سرم برای مطالعه این بیماری استفاده میشود، اما تست الایزا براساس انواع متمایز با پادگنهای مختلف و پادتن اختصاصی در زمینههای مختلف مطالعه بیماری تببرفکی برتری دارد و ممکن است این روش در آینده نزدیک جایگزین روشهای سنتی گردد. این مطالعه به منظور طراحی سیستم الایزا برای اندازهگیری پادتن تولید شده در خوکچههای هندی ایمن شده با ویروس تببرفکی انجام گرفت. ویروس تببرفکی تخلیص شده تهیه شد و محلول حاوی ویروس، پروتئین سنجی گردید. ایمنسازی پنج خوکچه هندی جهت تهیه سرم مثبت انجام گرفت و سپس از آنها جهت به دست آوردن سرم، خونگیری شد. آزمون اکترلونی صورت گرفت و در نهایت اقدام به طراحی سیستم الایزا شد. غلظت پروتئین، mlError! Bookmark not defined./ mg5/3 بدست آمد. با انجام تست اکترلونی، خطوط رسوبی میان سرم و پادگن ویروس تببرفکی تشکیل گردید. با استفاده از سیستم الایزای طراحی شده و با بهینه کردن شرایط، مقدار غلظت بهینه پادگن به میزان µg/well 1 و رقت مناسب سرمی به میزان 1:100 بدست آمد. در سیستم الایزا میزان انحراف معیار 35/0 و حد آستانه مقدار 03/1 تعریف شد، به طوری که نمونههای بالاتر از جذب نوری 03/1 نمونههای مثبت و نمونههای پائینتر از جذب نوری 03/1 نمونههای منفی بودند. آزمون الایزای طراحی شده میتواند برای سنجش پادتن تولید شده در خوکچه هندى ایمن شده با ویروس تببرفکى استفاده گردد که به نوبه خود در درمان با بهکارگیری روشهای آزمایشگاهی کم هزینه و مناسب مؤثر است.