یافته‌‌های اخیر در زمینه توکسین‌های NetB و TpeL جهت تولید واکسن علیه بیماری انتریت نکروتیک طیور

نویسندگان

1 بخش تحقیق و تولید واکسن های بی هوازی، آزمایشگاه تخصصی تحقیقات کلستریدیا، موسسه واکسن و سرم سازی رازی، سازمان ترویج آموزش توسعه کشاورزی، کرج، ایران

2 بخش تحقیق و تولید واکسن های بی هوازی، آزمایشگاه تخصصی تحقیقات کلستریدیا، موسسه واکسن و سرم سازی رازی، سازمان ترویج آموزش توسعه کشاورزی، کرج، ایران

3 بخش تحقیق و تولید واکسن های بی هوازی، آزمایشگاه تخصصی تحقیقات کلستریدیا، موسسه واکسن و سرم سازی رازی، سازمان ترویج آموزش توسعه کشاورزی، کرج، ایران

doi
10.22092/vj.2020.128693.1667
چکیده

کلستریدیوم شامل طیف گسترده‌ای از باکتری‌های میله‌ای شکل بی هوازی گرم مثبت و اسپورزا است که دارای 203 گونه بوده و بر اساس چهار توکسین اصلی یوتا (iA)، آلفا (cpa)، بتا (cpb) و اپسیلون، به پنج تایپ (A، B، C، D، E) طبقه‌بندی می‌شود. این باکتری‌ها یکی از مهم‌ترین عوامل بیماری‌زایی در حیوانات هستند. توکسین‌های متنوع این باکتری نقش مهمی در بیماری‌زایی دارند که از جمله جدیدترین آن‌ها می‌توان به NetB و TpeL اشاره نمود. این توکسین‌ها در ایجاد بیماری‌های متنوعی از جمله انتریت نکروتیک نقش دارند. در این مقاله مروری بر مطالعات انجام یافته بر روی کلیات توکسین‌های NetB و TpeL ارائه می‌گردد. همچنین پیشرفت‌های اخیر جهت تولید واکسن‌های نسل جدید را ارائه و تجزیه و تحلیل‌هایی که توسط دانشمندان با استفاده از نرم‌افزارهای بیوانفورماتیک روی توالی‌های tpeL و netB برای تولید پروتئین نوترکیب انجام یافته، مورد بررسی قرار می‌گیرد. در این راستا محققین در آزمایشات مختلف ژن فیوژن را توسط PCR سنتز نموده و پلاسمید نوترکیب را در باکتری E. coli ترانسفورم کرده‌اند. پروتئین فیوژن حاصله توسط نیکل(Ni-NTA) خالص شده و جهت تأیید از تکنیک‌های SDS-PAGE و وسترن‌بلات استفاده گردیده و جهت سنجش ایمنی، آزمایش خنثی‌سازی سرم در خرگوش استفاده شده است. همچنین در مطالعات دیگر موتانت‌هایی با فعالیت سایتوتوکسیک کمتر توسط کیت به صورت site-directed mutagenesis طراحی شده و با توالی‌سازی تأیید شدند. نتایج مطالعات آنان حاکی از آن است که واکسن‌های نسل جدید می‌توانند به عنوان کاندید واکسن علیه انتریت نکروتیک طیور مورد استفاده قرار گیرند.