تشخیص مولکولی و میکروسکوپی گونه‌های آناپلاسما در شترهای کشتار شده در استان گلستان

نویسندگان

1 عضو هیات علمی موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات و آموزش کشاورزی، کرج، ایران

doi
10.22092/vj.2019.127506.1611
چکیده

آناپلاسما میکروارگانیسم درون سلولی اجباری است که در سلول‌های خونی میزبان زندگی می‌کند و منجر به بیماری و تحمیل هزینه‌های مراقبتی زیادی می‌شود. هدف از مطالعه حاضر بررسی مولکولی و میکروسکوپی حضور جنس و گونه‌های آناپلاسما در شترهای استان گلستان بود. نمونه‌های خون از شترهای کشتار شده در کشتارگاه صنعتی اینچه برون برای مدت دو سال جمع‌آوری شد. بررسی میکروسکوپی با تهیه گسترش‌های خونی رنگ‌آمیزی شده با گیمسا صورت گرفت. آزمون مولکولی با تکثیر اولیه قطعات DNA و تأیید آن‌ها با انجام nested-PCR صورت گرفت. از پرایمرهای اختصاصی بر روی ژن‌های 16S rRNA و msp4 برای تکثیر گونه‌های مختلف آناپلاسما استفاده شد. قطعات تکثیری حاصل از PCR اولیه و nested-PCR حضور جنس آناپلاسما در 33 نمونه از 90 نمونه (67/36 درصد) را مثبت نشان داد. در میان نمونه‌های حاوی جنس آناپلاسما، 22/2 درصد، 22/22 درصد و 33/13 درصد با PCR اختصاصی به‌ترتیب گونه‌های آناپلاسما مارجیناله، آناپلاسما فاگوسیتوفیلم و آناپلاسما بویس شناسایی شدند. هیچ کدام از نمونه‌ها با PCR اختصاصی حضور گونه آناپلاسما سنتراله را نشان ندادند. مشاهده میکروسکوپی اجرام آناپلاسمایی درون گلبول‌های قرمز حاکی از حضور جنس آناپلاسما در 33/33 درصد از گسترش‌های خونی بود. با مقایسه آزمون مولکولی و میکروسکوپی حساسیت، اختصاصیت و صحت برای شناسایی جنس آناپلاسما به‌ترتیب 21/21 درصد، 67/66 درصد و 50 درصد بدست آمد. نتایج مطالعه حاکی از حضور آناپلاسما در میان شترهای کشتار شده در استان گلستان بود. بر طبق نتایج، بررسی مولکولی آناپلاسما نتایج دقیق‌تری نسبت به بررسی میکروسکوپی بدست می‌دهد.