ارزیابی تغلیظ ویروس تب برفکی با استفاده از سیستم کراس فلو (Cross flow)

نویسندگان

1 بخش تحقیق و تولید واکسن تب برفکی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

doi
10.22092/vj.2018.100717.1014
چکیده

واکسن تب برفکی از جمله واکسن‌های غیرفعال ویروسی است و توانمندی آن به کیفیت آنتی‌ژن٬ میزان غلظت آنتی‌ژن در هر دز واکسن، و یاور بستگی دارد. در این مطالعه برای ارایه بهترین روش تغلیظ آنتی‌ژن، از سه تیپ ویروس تب برفکی شامل A05 ،O و Asia فعال و غیر‌فعال استفاده شد. ویروس‌ها جداگانه در سلول BHK21 تلقیح شدند و نیمی از هر سوسپانسیون ویروسی با اتیلن ایمین غیر فعال شد. پس از انجام آزمایش بی‌ضرری و اطمینان از غیر فعال شدن کامل ویروس‌ها، از روش فیزیکی اولترافیلتراسیون (سیستم کراس فلو) و روش شیمیایی تیمار با پلی اتیلن گلیکول (6000 PEG) برای تغلیظ ویروس‌ها استفاده شد. بر روی نمونه‌های تهیه شده از مراحل مختلف، آزمایش‌های جذب ویروس بر روی ژل هیدروکسید آلومینیوم، ثبوت مکمل، الایزا، عیارسنجی TCID50، و گرادیان غلظتی سوکروز برای برآورد میزان بازیافت ویروس پس از تغلیظ انجام شد. یافته‌های حاصل از این بررسی نشان داد میزان تغلیظ تأثیر قابل توجهی در جذب ویروس توسط ژل هیدروکسید آلومینیوم ندارد و میزان بازیافت در تغلیظ ویروس با استفاده از اولترافیلتر بیشتر از تیمار با PEG است.