ارزیابی ویژگی های داربست کلاژنی سنتز شده به روش آنزیمی و کارایی آن جهت لود کردن سلولهای فیبروبلاست نئوناتال
نویسندگان
1 مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی پزشکی، واحد اشکذر، دانشگاه آزاد اسلامی، اشکذر، یزد، ایران
2 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد همدان، دانشگاه آزاد اسلامی، همدان، ایران
3 مرکز تحقیقات پوست و سلولهای بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران
4 گروه بیولوژی، کالج بین المللی اویسینا، بوداپست، مجارستان
5 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد تهران شرق، دانشگاه آزاد اسلامی ، تهران، ایران
doi
10.22070/daneshmed.2022.15373.1140چکیده
مقدمه و هدف: داربستهای کلاژنی یکی از داربستهای مناسب جهت لود شدن سلولهای بنیادی می باشند، اما میزان زندهمانی سلولهای فیبروبلاست لود شده بر روی داربستهای کلاژنی از مسایل مهم می باشد. براین اساس مطالعه حاضر به بررسی میزان زندهمانی سلولهای فیبروبلاست لود شده بر داربست کلاژنی پرداخته است.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی آزمایشگاهی، نمونه پوست انسان طی عمل جراحی ختنه از نوزادان دریافت شد و کلاژن گاوی به صورت آماده تهیه شد. سلولهای فیبروبلاست پس از جدا شدن از قطعات بافتی به وسیله لام هموسیتومتر شمارش شدند. زندهمانی سلولها با استفاده از روشهای فلوسایتومتری بررسی شدند. به منظور بررسی هویت سلولهای فیبروبلاست از مارکر ویمنتین استفاده شد. سلولهای فیبروبلاست بر روی هیدروژل کشت شدند. به منظور بررسی اثر سیتوتوکسیک هیدروژل بر سلولها از روش MTT استفاده شد. دادهها با استفاده از آزمون تی تست مستقل آنالیز شدند.نتایج: زندهمانی سلولهای فیبروبلاست جدا شده از پوست ختنه گاه در اولین روز پس از جدا سازی برابر 89 درصد بود. نتایج حاصل از بررسی ایمنوسیتوشیمی هویت سلولهای فیبروبلاست را تایید کرد. نتایج MTT نشان دادند که هیدروژل کلاژن اثر سمیت معناداری بر سلولهای فیبروبلاست لود شده نداشت. نتایج بررسی میکروسکوپی فلورسنت نشانگر آن بود که زنده مانی سلولهای لود شده بر هیدروژل برابر 96 درصد بود.نتیجهگیری: نتایج حاصل از این پژوهش نشان دادند که داربستهای کلاژنی جهت لود کردن سلولهای فیبروبلاست جدا شده از پوست ختنه گاه مناسب بوده و می توانند در مهندسی بافت و انتقال سلولهای فیبروبلاست به نواحی آسیب دیده کاربرد داشته باشند.