کلونینگ مولکولی سابیونیتهای آلفا و بتای هورمون لوتئینیزه با استفاده از توالیIRES در شاتل وکتورPEGFP-N1 و تطابق آن با بانک ژنی
نویسندگان
1 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایلام
2 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
3 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
4 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز
5 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
doi
چکیده
مقدمه و هدف:هورمونهای گلیکوپروتئینی ترشحشده از هیپوفیز قدامی از دو زیرواحد آلفا و بتا با اتصال غیرکوالان تشکیلشدهاست، زیرواحد الفا در هورمونهای این خانواده یکسان است و تفاوت در فعالیت بیولوژیک این دسته ازهورمونها به زیرواحد بتای آنها ارتباطدارد. با توجه به عدم دسترسی مناسب به هورمون و امکان ایجاد آلودگی، در این تحقیق تلاششد تا با استفاده از توالیIRES زیرواحدهای آلفا و بتای این ژن بهمنظور استفاده درمانی، در پلاسمید بیانی pEGFP-N1کلون شود. مواد و روشها:تحقیق با طراحی تجربی انجامگرفت،بهمنظور کلونینگ زیرواحدهای آلفا و بتای هورمون LH، ابتدا توالی نوکلوتیدی طراحیشده در پلاسمید حاملpGEM-BIسنتز شد. توالی مورد نظر در سایت SmaI پلاسمیدبیانی pEGFP-N1،سابکلون شد. پلاسمید حاصل باانجام هضم آنزیمی و PCR،مورد تأیید قرارگرفت. نتایج:آنالیزآنزیمیو PCRنشانداد که پلاسمید-α-IRES-β pEGFP-Nl، حاوی توالی صحیحی بوده، با توالی ژن مورد نظر در بانک ژن تطابقدارد. نتیجهگیری:اینپلاسمیدبهدلیلساختارصحیحبرایانتقالبهسیستمیوکاریوتیوارزیابیبیان،مناسب است.