انتقال سازه ژن درمانی توسط نانوذرات پلی پلکسی (نوع پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده) به سلولهای سرطانی روده بزرگ
نویسندگان
1 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
2 دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران
3 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
4 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
doi
چکیده
مقدمه و هدف: هدف از این تحقیق، تهیه نانوذرات پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده بانانوبادی ضد TAG-72 برای انتقال سازه کدکننده ژن کشنده t-Bid به سلولهای سرطان روده بزرگ (کولون) انسانی است. مواد و روشها: ابتدا نانوبادی نوترکیب تخلیصشده با SDS-PAGE، وسترن بلاتینگ و الایزا تأییدشد. پلی اتیلن گلیکول روی نانوذرات پلی اتیلن ایمین (PEI) سوار شد و درنهایت با اتصال کووالان نانوبادی بر سطح نانوذرات، ناقل پلی پلکسی هدفمند ساختهشد. بار سطحی و اندازه نانوذرات با استفاده از دستگاه مالورن و دستگاه نانو سایت بررسی و کارایی حامل ژنی ساختهشده در انتقال ژن کشنده به رده های سلولی آدنوکارسینومای روده بزرگ با آزمون Real Time PCR بررسیشد. نتایج: نتایج دستگاه مالورن، ساخت نانوذرات هدفمند با اندازه ۱۶۸ نانومتر و پتانسیل سطحی 7،18+ میلی ولت را نشانداد. با استفاده از آزمون تاخیر حرکت در ژل، در برگیری و فشردهسازی صحیح و مناسب سازه ژنی را تأییدکردیم. نتایج Real Time PCR هدایت بیان ژن هدف به سلولهای توموری روده بزرگ را تأییدکردند. نتیجهگیری: نتایج این تحقیق، کارایی نانوذرات پلی پلکسی هدفمندشده با نانوبادی در انتقال ژن و قابلیت آنها برای هدفمند سازی انتقال ژن به سلول را تأییدمیکند.