انتقال سازه ژن درمانی توسط نانوذرات پلی پلکسی (نوع پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده) به سلول‌های سرطانی روده بزرگ

نویسندگان

1 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس

2 دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران

3 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس

4 گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس

doi
چکیده

   مقدمه و هدف: هدف از این تحقیق، تهیه نانوذرات پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده بانانوبادی ضد TAG-72 برای انتقال سازه کدکننده ژن کشنده t-Bid به سلول­های سرطان روده بزرگ (کولون) انسانی است.   مواد و روش‌ها: ابتدا نانوبادی نوترکیب تخلیص­شده با SDS-PAGE، وسترن بلاتینگ و الایزا تأیید­شد. پلی اتیلن گلیکول روی نانوذرات پلی اتیلن ایمین (PEI) سوار شد و درنهایت با اتصال کووالان نانوبادی بر سطح نانوذرات، ناقل پلی پلکسی هدفمند ساخته­شد. بار سطحی و اندازه نانوذرات با استفاده از دستگاه مالورن و دستگاه نانو سایت بررسی و کارایی حامل ژنی ساخته­شده در انتقال ژن کشنده به رده های سلولی آدنوکارسینومای روده بزرگ با آزمون Real Time PCR بررسی­شد.   نتایج: نتایج دستگاه مالورن، ساخت نانوذرات هدفمند با اندازه ۱۶۸ نانومتر و پتانسیل سطحی 7،18+ میلی ولت را نشان­داد. با استفاده از آزمون تاخیر حرکت در ژل، در برگیری و فشرده­سازی صحیح و مناسب سازه ژنی را تأییدکردیم. نتایج Real Time PCR  هدایت بیان ژن هدف به سلول­های توموری روده بزرگ را تأییدکردند.   نتیجه‌گیری: نتایج این تحقیق، کارایی نانوذرات پلی پلکسی هدفمندشده با نانوبادی در انتقال ژن و قابلیت آنها برای هدفمند سازی انتقال ژن به سلول را تأییدمی­کند.