بهینه سازی شرایط القا و تثبیت کشت ریشه‌های مویین گیاه کاسنی (Cichorium intybus) حاصل از تلقیح آگروباکتریوم رایزوژنز (Agrobacterium rhizogenes)

نویسندگان
doi
10.22103/jab.2012.474
چکیده

ریشه‌ها‌ی مویین حاصل از تلقیح آگروباکتریوم رایزوژنز از قابلیت سنتز و تجمع متابولیت‌های ثانویه گیاهی برخوردار می‌باشند. در دو دهه‌ی اخیر توجه قابل ملاحظه‌ای به سنتز ترکیبات ثانویه ارزشمند در ریشه‌های مویین معطوف شده است، زیرا ریشه‌های تغییر یافته ژنتیکی برخلاف سوسپانسیون سلولی، متابولیت‌های ثانویه را با ثبات ژنتیکی و بیوسنتزی بیشتری تولید می‌کنند. کاسنی (Cichorium intybus L.) گیاهی دارویی، دو ساله یا پایا و متعلق به تیره گل ستاره‌ای‌ها (Asteraceae) است. این گیاه حاوی ترکیبات دارویی بسیار مهمی از جمله اینولین، اسکولین، ترکیبات فرار، کومارین، فلاونوئیدها و ویتامین‌ها است. در این تحقیق به منظور بهینه‌سازی شرایط کشت ریشه مویین، کوتیلدون‌های گیاه کاسنی با سویه‌های مختلف باکتری آگروباکتریوم رایزوژنز تلقیح و بر روی سه محیط کشت گیاهی مختلف کشت شدند. تعداد ریشه‌های تولید شده در تیمارهای مختلف محیط کشت ثبت گردید و تائید ریشه‌های مویین با استفاده از واکنش PCR برای تکثیر اختصاصی ژن‌های rol Bو rol C انجام شد. بر اساس شدت ریشه‌زایی حاصل از سویه‌های آگروباکتریوم در محیط کشت‌های مختلف، بهترین سویه آگروباکتریوم به همراه محیط کشت بهینه جهت تثبیت کشت ریشه‌های مویین کاسنی تعیین گردیدند. سویه‌های A4، A13 و 15834 موفق به القای ریشه مویین در گیاه کاسنی شدند و محیط کشت MS به عنوان مناسب‌ترین محیط کشت به منظور القای ریشه‌های مویین و تثبیت کشت آنها معرفی گردید