فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

مقدمه: سرطان از رایجترین علل مرگ و میر انسانی در جوامع امروزی است که تلاش‌های بسیار گسترده‌ای برای مقابله با آن در حال انجام است. ایمونوتوکسین‌های مبتنی بر Anti-EGFRVIII می‌توانند با هدایت بخش‌های توکسینی به سلول‌های سرطانی که بیان بیش از حد گیرنده EGFRVIII دارند، منجر به مرگ سلولی آنها شوند. هدف مطالعه حاضر توسعه یک ایمونوتوکسین انسانی جدید ضد EGFRVIII (huscFv-PE38 EGFRVIII) با ادغام ژنتیکی آنتی بادی تک زنجیره ای ضد EGFRVIII انسانی با اگزوتوکسین A کوتاه شده سودوموناس آئروژینوزا (PE) (PE38KDEL) است. روش کار: قطعه PE-38 اگزوتوکسین A با استفاده از PCR تکثیر و به PET22b-Anti-EGFRVIII huscFv متصل شد. واکنش با روش PCR وهضم آنزیمی تایید شد. ایمونوتوکسین حاصل در E. coli BL21 (plys S) بیان شد و سپس توسط ستون کروماتوگرافی Ni-NTA تخلیص شد. پس از آن، واکنش ایمونوتوکسین تخلیص شده با روش‌های الایزا و MTT مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: آزمایش‌های PCRو هضم آنزیمی، صحت و یکپارچگی ساختار ایمونوتوکسین طراحی شده را تأیید کردند. تخلیص ایمونوتوکسین بیان شده توسط ستون کروماتوگرافی نیکل منجر به ساخت یک ایمونوتوکسین نوترکیب بسیار خالص با وزن مولکولی ۶۳ کیلو دالتون در ژل SDS-PAGE شد. نتیجه‌گیری: نتایج  مطالعه حاضر نشان داد که ایمونوتوکسین طراحی شده می‌تواند به عنوان یک انتخاب امیدوارکننده برای مهار سولهای سرطانی EGFRVIII مثبت در نظر گرفته شود.