شناسایی مولکولی باکتری بروسلا در نمونه‌های کلینیکی منطقه سیستان با روش واکنش زنجیره‏ای پلیمراز چندگانه

نویسندگان

1 استادیار، گروه زیست‏شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه زابل، زابل، ایران

2 استادیار، گروه زیست‏شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه زابل، زابل، ایران

3 دانش‏ آموخته کارشناسی ارشد ژنتیک، گروه زیست‏شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه زابل، زابل، ایران

4 دانشیار، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه زابل، زابل، ایران

doi
10.22034/nfvm.2023.377326.1166
چکیده

بروسلوز یا تب مالت (تب مدیترانه‌ای) به‌واسطه رشد و تکثیر باکتری کوکوباسیل گرم منفی بروسلا در سلول‌های پستانداران رخ می‌دهد و این بیماری به‌عنوان یک بیماری مشترک بین انسان و دام حائز اهمیت می‌باشد. تست‌های سرولوژی متعددی جهت شناسایی این باکتری مورد بررسی قرار گرفته‌اند، با این‏حال این روش‌ها محدودیت‌هایی در شناسایی دقیق باکتری دارند. پژوهش حاضر، با هدف بررسی و شناسایی مولکولی باکتری بروسلا در نمونه‌های جمع‌آوری شده از گوسفندان آلوده در منطقه سیستان با استفاده از تکنیک PCR چندگانه انجام شد. در ابتدا نمونه‌های خون و شیر از گوسفندان جمع‌آوری گردید. تایید آلودگی به باکتری در ابتدا با استفاده از نمونه‌های خون و روش سرولوژی رزبنگال صورت گرفت. در ادامه DNA از شیرهای جمع‌آوری شده استخراج شد و بررسی مولکولی با استفاده از PCR چندگانه و تکثیر دو ژن Omp31  و BLS به‌منظور تکثیر قطعات با سایزهای bp 347 و bp 256 انجام پذیرفت. از 40 نمونه کلینیکی مورد مطالعه همگی تست رزبنگال مثبت را نشان دادند اما بررسی مولکولی با استفاده از PCR چندگانه 5 نمونه مثبت کاذب تایید شده با تست رزبنگال را نشان داد. استفاده از روش‌های شناسایی مولکولی به جهت حساسیت و دقت بالاتر و صرف زمان کمتر می‌تواند به‌عنوان گزینه مناسب برای شناسایی پاتوژن‌های بیماری‌زا مورد استفاده قرار گیرد.