فهرست نشریات علمی دسترسی آزاد ایران

کلستریدیوم پرفرنژنس یک باکتری بی‌هوازی است که از بین سویه‌های آن فقط تیپ B و C می‌توانند بتا توکسین را تولید کنند. بتا توکسین نقش مهمی در بسیاری از بیماری‌های انسان و حیوان دارد و تأثیر مهلکی بر روده می‌گذارد. مطالعه‌ی حاضر با هدف مقایسه دو روش خالص‌سازی برای استخراج بتا توکسین از کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ B انجام شد. به‌عنوان روش اول، بتا توکسین با استفاده از رسوب سولفات آمونیوم، کروماتوگرافی ستونی (سفادکس G-25) و کروماتوگرافی تعویض یونی خالص‌سازی شد، در حالی که در روش دوم از کروماتوگرافی افینیتی استفاده شد. فعالیت همولیزی و مقدار پروتئین در هر مرحله از خالص‌سازی اندازه‌گیری شد. خلوص بتا توکسین در هر مرحله با استفاده از الکتروفورز ((SDS-PAGE بررسی شد. با توجه به نتایج مقایسه این دو روش نشان داد که بازده روش اول 8/82 درصد و بازده روش دوم 1/90 درصد بود. مقادیر فعالیت ویژه برای روش اول و دوم به‌ترتیب  U/mg1/2368 و U/mg 5/164 محاسبه شد. نتایج ما نشان می‌دهد که کروماتوگرافی افینیتی می‌تواند برای خالص‌سازی بتا توکسین از کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ B با خلوص بالا و نسبت فعالیت به پروتئین (HU/mg 4370) استفاده شود.