افزایش حلالیت آنزیم نوترکیب گلوتاتیون S- ترانسفراز استخراج شده از ماهی سفید (Rutilus kutum) با استفاده از روش مبتنی بر چپرون در باکتری Escherichia coli
نویسندگان
1 دانشجوی دکتری بیوشیمی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
2 دانشیار گروه زیستشناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
3 مربی مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران، تهران، ایران
4 استاد گروه زیستشناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
doi
10.22124/japb.2021.18601.1409چکیده
دستیابی به مقدار زیادی از پروتئین نوترکیب به صورت محلول یک نیاز اساسی و زیربنای بسیاری از پژوهشها در تمام شاخههای بیوتکنولوژی است. به نظر میرسد بین روشهای عمومی و اختصاصی موجود برای افزایش حلالیت پروتئین نوترکیب، بیان مشترک پروتئین مورد نظر با چپرونهای مولکولی یک راه حل مناسب برای کمک به تا شدن صحیح پروتئین تازه سنتز شده و کاهش تجمعات پروتئینی باشد، با این حال اثربخشی چپرونهای مختلف به طور گستردهای متفاوت است. به منظور بررسی کارایی چپرونهای ماهیان در افزایش حلالیت پروتئینهای نوترکیب، در این مطالعه کلونسازی و بیان همزمان دو پروتئین Hsp70 مربوط به اردکماهی Esox lucius (El-Hsp70) و گلوتاتیون S- ترانسفراز کلاس µ از ماهی سفید Rutilus kutum (Rk-GSTµ) در میزبان E. coli انجام شد و به منظور بررسی برهمکنش دو پروتئین از آنالیز الکتروفورز یک بعدی و محاسبه فعالیت ویژه آنزیم Rk-GSTµ استفاده شد. با توجه به این که حلالیت و فعالیت ویژه آنزیم Rk-GSTµ در سلولهای بیان کننده نسبت به نمونههای کنترل افزایش یافت، این مطالعه یافته امیدوارکننده دیگری در مورد نقش مثبت چپرونها در افزایش محتوای محلول پروتئینهای نوترکیب فراهم کرده است.